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如何對PCR儀進行正確清洗?

閱讀:9513        發(fā)布時間:2020-12-23
  PCR儀可標記有熒光素的探針與模板DNA混合后,完成高溫變性,,低溫復(fù)性,,適溫延伸的熱循環(huán),并遵守聚合酶鏈反應(yīng)規(guī)律,,與模板DNA互補配對的探針被切斷,,熒光素游離于反應(yīng)體系中,在特定光激發(fā)下發(fā)出熒光,,隨著循環(huán)次數(shù)的增加,,被擴增的目的基因片段呈指數(shù)規(guī)律增長,通過實時檢測與之對應(yīng)的隨擴增而變化熒光信號強度,,求得CT值,,同時利用數(shù)個已知模板濃度的標準品作對照,即可得出待測標本目的基因的拷貝數(shù),。
 
  PCR儀的PCR反應(yīng)過程的關(guān)鍵是升,、降溫過程的時間控制,要求越短越好,,當PCR儀的降溫過程超過60s,,就應(yīng)該檢查儀器的制冷系統(tǒng),對風冷制冷的PCR儀要較*地清理反應(yīng)底座的灰塵,;對其他制冷系統(tǒng)應(yīng)檢查相關(guān)的制冷部件,。
 
  PCR儀清洗:
 
  1.樣品池的清洗
 
  先打開蓋子,后用95%乙醇或10%清洗液浸泡樣品池5min,,然后清洗被污染的孔,;用微量移液器吸取液體,用棉簽吸干剩余液體,;打開PCR儀,,設(shè)定保持溫度為50℃的PCR程序并使之運行,讓殘余液體揮發(fā)去除,。一般5~10min即可,。
 
  2.熱蓋的清洗
 
  對于PCR儀當有熒光污染出現(xiàn),而且這一污染并非來自樣品池時,;或當有污染或殘跡物影響到熱蓋的松緊時,,需要用壓縮空氣或純水清洗墊蓋底面,確保樣品池的孔鏡干凈,,無污物阻擋光路,。
 
  3.PCR儀外表面的清洗
 
  清洗儀器的外表面可以除去灰塵和油脂,但達不到消毒的效果,。選擇沒有腐蝕性的清洗劑對PCR儀的外表面進行清洗,。

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