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介紹細(xì)胞破碎的幾個(gè)機(jī)械方法
閱讀：1737 發(fā)布時(shí)間：2021-11-28
細(xì)胞破碎是指利用外力破壞細(xì)胞膜和細(xì)胞壁,，使細(xì)胞內(nèi)容物包括目的產(chǎn)物成分釋放出來(lái)的技術(shù)，是分離純化細(xì)胞內(nèi)合成的非分泌型生化物質(zhì)（產(chǎn)品）的基礎(chǔ),。結(jié)合重組DNA技術(shù)和組織培養(yǎng)技術(shù)上的重大進(jìn)展，以前認(rèn)為很難獲得的蛋白質(zhì)現(xiàn)在可以大規(guī)模生產(chǎn),。
但是由于細(xì)菌,、酵母、真菌、植物細(xì)胞壁的組成成分不同,，且同類細(xì)胞結(jié)成的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)也不同,，所以其細(xì)胞壁的堅(jiān)固程度不同。而動(dòng)物細(xì)胞雖沒(méi)有細(xì)胞壁,，但具有細(xì)胞膜,，也需要一定的細(xì)胞破碎方法來(lái)破膜，達(dá)到提取產(chǎn)物的目的,。
介紹細(xì)胞破碎的幾個(gè)機(jī)械方法
1.組織搗碎
將材料配成稀糊狀液,，放置于筒內(nèi)約1/3體積，蓋緊筒蓋,，將調(diào)速器先撥至最慢處,，開(kāi)動(dòng)開(kāi)關(guān)后，逐步加速至所需速度,。一般用于動(dòng)物組織,、植物肉質(zhì)種子、柔嫩的葉芽等,，轉(zhuǎn)速可高達(dá)10000rpm/M以上,。由于旋轉(zhuǎn)刀片的機(jī)械切力很大,制備一些較大分子如核酸則很少使用。
2.勻漿器
先將剪碎的組織置于管中,，再套入研桿來(lái)回研磨,，上下移動(dòng)，即可將細(xì)胞研碎,。勻漿器的研缽磨球和玻璃管內(nèi)壁之間間隙保持在十分之幾毫米距離,。制作勻漿器的材料，除玻璃外,，還可以用硬質(zhì)塑料,、不銹鋼、人造熒光樹(shù)脂等,。
此法細(xì)胞破碎程度比高速組織搗碎機(jī)為高,，適用于量少和動(dòng)物臟器組織。
存在的問(wèn)題：較易造成堵塞的團(tuán)狀或絲狀真菌,，較小的革蘭氏陽(yáng)性首以及有些亞細(xì)胞器,，質(zhì)地堅(jiān)硬，易損傷勻漿閥,，也不適合用該法處理,。
3.研缽
多用于細(xì)菌或其他堅(jiān)硬植物材料，研磨時(shí)常加入少量石英砂,，玻璃粉或其他研磨劑,，以提高研磨效果,。
4.細(xì)菌磨
是一種改良了的研磨器，比研缽具有更大的研磨面積,，而且低部有出口,。操作時(shí)先把細(xì)菌和研磨粉調(diào)成糊狀，每次加入一小勺,，研磨20-30秒即可將細(xì)菌細(xì)胞*磨碎,。