詳細(xì)介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),,板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴(yán)格要求,。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺上,,以便 不時觀察,,待對照管顯色適當(dāng)時,即可終止酶反應(yīng),。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì),。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測定結(jié)果,,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
產(chǎn)品名稱 | AQP-0 elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human Aquaporin 0, AQP-0 Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴(yán)格把關(guān),,我司嚴(yán)格按照進(jìn)行,已獲得國家承認(rèn)的“三證”,,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,,只要客戶提前下單,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必?fù)?dān)心會有過期的試劑,。我司的試劑,值得您選擇,。
2.試劑的準(zhǔn)備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,再進(jìn)行測定,,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達(dá)到所需的溫度,以滿足后面的測定需求,。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風(fēng)濕因子,、補(bǔ)體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,;
類風(fēng)濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標(biāo)本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理;
③檢測抗原時,,可用加入到標(biāo)本稀釋液中使RF降解,;
補(bǔ)體的控制方法:
①用EDTA稀釋標(biāo)本,;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標(biāo)本溶血,、細(xì)菌污染,、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,,以防溶血;收集標(biāo)本時采用無菌試管,,經(jīng)檢測后再低溫凍存,;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標(biāo)本,;對于凝固不全的血標(biāo)本可適當(dāng)加入抗凝劑,,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清,。
操作步驟:
1)使用前,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔,、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘,。
6)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8)取出酶標(biāo)板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
具有如下優(yōu)點(diǎn):
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三,、吸附性能好,,空白值低,孔底透明度高的固相載體,;
四,、適用血清、血漿,、組織勻漿液,、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi),。
SYF2蛋白抗體
表小檗Table ofBerberine保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
膽固醇?;D(zhuǎn)移酶2抗體
四小檗Four berberinebisulfate保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
突觸結(jié)合蛋白1抗體
華蟾毒精(華蟾酥毒基)Cinobufagin (cinobufagin)保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
Saitohin蛋白抗體
常山Changshan ketone保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
化突觸結(jié)合蛋白1抗體
蟾毒它靈Bufotalin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%10mg/支
突觸結(jié)合蛋白5抗體
遠(yuǎn)華蟾毒精Yuanhua toadpoison fine保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
化D酪氨激酶衰減蛋白1抗體
華蟾毒它靈Hua bufotalin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
可溶性附著蛋白α-SNAP抗體
沙蟾毒精Arenobufagin保存:-20℃規(guī)格:HPLC≥98%20mg/支
AQP-0 elisa試劑盒C8orf80Phospho-cdc25C (Ser216)人核因子κB(NF-κB)免疫試盒
C9orf3Phospho-CDK9 (Thr186)人核心結(jié)合因子α1,CBFA1/RUNX2 免疫試盒
C8orf47Phospho-Connexin 43 (Ser368)人核心蛋白聚糖(DCN)免疫試盒
C8orf48cofilin人核糖體合成蛋白NSA2同源物(NSA2)免疫試盒
SGTAUBE2W葡萄糖6-脫酶2抗體
SUGT1UNCX葡萄糖6-N-酰基轉(zhuǎn)移酶1抗體
SKA3ULBP3谷酰胺酶1抗體
SKA2USP22G蛋白偶聯(lián)受體GPR161蛋白抗體
SIM1UBF1G蛋白偶聯(lián)受體GPR180蛋白抗體
SOX14SLC22A11G蛋白通路抑制物蛋白2抗體