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產(chǎn)品簡介
丙型肝炎病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格運(yùn)輸及保存：低溫運(yùn)輸，-20℃保存,，有效期一年,。使用本試劑盒提供的陽性對(duì)照時(shí)，由于其濃度較高,，一定要注意不要污染其他試劑和成分,。在專門的區(qū)域操作。
詳細(xì)介紹
丙型肝炎病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),，能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,，經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,，擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0＜E＜1,擴(kuò)增效率＝倍,，使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Hepatitis C Virus(HCV)5RTPCR |
貨號(hào) | YS30870-R |
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合,；
②堿基配對(duì)原則,；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性,；
④靶基因的特異性與保守性。
適用范圍【參考值】
1.試劑盒有效性判定：
（1）陽性對(duì)照：有典型S型擴(kuò)增曲線或Ct值≤35,。
（2）陰性對(duì)照：Ct值＞38或無Ct值,，線形為直線或輕微斜線，無指數(shù)增長期,。
2.標(biāo)本結(jié)果判定：
（1）陽性：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值≤35或有明顯指數(shù)增長期,。
（2）可疑：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值在35～38范圍內(nèi)。此時(shí)應(yīng)對(duì)標(biāo)本進(jìn)行重復(fù)檢測(cè),，如重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果Ct值仍在35～38范圍內(nèi),，有明顯指數(shù)增長期，則判定為陽性,，否則為陰性,。
（3）陰性：標(biāo)本檢測(cè)結(jié)果Ct值＞38或無Ct值。
PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
典型的PCR由（1）高溫變性模板,；（2）引物與模板退火,；（3）引物沿模板延伸三步反應(yīng)組成一個(gè)循環(huán)，通過多次循環(huán)反應(yīng),，使目的DNA得以迅速擴(kuò)增,。
其主要步驟是：
將待擴(kuò)增的模板DNA置高溫下（通常為93℃-94℃）使其變性解成單鏈；
人工合成的兩個(gè)寡核苷酸引物在其合適的復(fù)性溫度下分別與目的基因兩側(cè)的兩條單鏈互補(bǔ)結(jié)合,，兩個(gè)引物在模板上結(jié)合的位置決定了擴(kuò)增片段的長短；
耐熱的DNA聚合酶（Taq酶）在72℃將單核苷酸從引物的3’端開始摻入,，以目的基因?yàn)槟０鍙?’→3’方向延伸,，合成DNA的新互補(bǔ)鏈。
實(shí)驗(yàn)過程：
一,、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2．對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物（在PCR反應(yīng)中,，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,，而不能從無到有，憑空合成,。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物,。可以是DNA也可以是RNA,，一般20多bp,，需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,，擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP,、dCTP、dGTP,、dTTP各2mM
5．Taq酶
二,、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中,。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μ
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,，不加或添加石蠟油。
2．調(diào)整好反應(yīng)程序,。將上述混合液稍加離心,，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴(kuò)增,。一般：在93℃預(yù)變性3-5min,，進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次,，后在72℃ 保溫7min,。
3．結(jié)束反應(yīng)，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長期保存,。
4．PCR的電泳檢測(cè)：如在反應(yīng)管中加有石蠟油,，需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液，以除去石蠟油,；否則,，直接取5-10μl電泳檢測(cè)
三、注意事項(xiàng)
１．PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行,。好設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室,。
２．純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有影響。一般而言,，只要能夠得到可靠的結(jié)果,，純化的方法越簡單越好。
３．所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染,。操作過程中均應(yīng)戴手套,。
下列是公司正在*的產(chǎn)品：
CXCL7/PBP antibody [500-M33]原裝,、分裝紫杉醇
Recombinant Human CXCL7/PBP protein原裝、分裝紫杉醇（標(biāo)準(zhǔn)品）
Recombinant Human CXCL7/PBP protein原裝,、分裝鹽帕洛諾司瓊
PF4 antibody原裝,、分裝鹽帕洛諾司瓊
Recombinant human PF4 protein原裝、分裝鹽帕洛諾司瓊
Recombinant human PF4 protein原裝,、分裝巴龍
IL-16 antibody原裝,、分裝巴龍
IL-17 antibody原裝、分裝巴龍
Aquaporin 1 antibody [1/22]原裝,、分裝巴龍MMP8 antibody原裝,、分裝3-(1-萘基)-L-氨
NSE antibody原裝、分裝Fmoc-3-(2-萘基）-D-氨
Claudin 2 antibody原裝,、分裝Fmoc-3-(2-萘基）-D-氨
p15 INK4b antibody原裝,、分裝D-3-（2-吡啶基）-氨
p63 antibody原裝、分裝D-3-（2-吡啶基）-氨
Oligodendrocyte Specific Protein antibody原裝,、分裝D-3-（2-吡啶基）-氨
beta Catenin (phospho S33) antibody原裝,、分裝3-（3-吡啶基）-L-氨
Peripherin antibody原裝、分裝3-（3-吡啶基）-L-氨
E2F6 antibody原裝,、分裝3-（3-吡啶基）-L-氨
丙型肝炎病毒5型PCR檢測(cè)試劑盒規(guī)格CNTFR antibody [MM0190-10L29]原裝,、分裝5,6-二溴-2,1,3-苯并噻二唑(>98.0%(GC))
Factor X + Xa antibody [MM0192-10A10]原裝、分裝2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))
FXI antibody [MM0193-7C38]原裝,、分裝2-(2-羥苯基)苯并噻唑(>98.0%(HPLC)(T))
IL-8 antibody [MM0219-7F11]原裝,、分裝4-氨基對(duì)三聯(lián)苯(>97.0%(GC))
CXCL9 antibody [MM0220-7F11]原裝、分裝4-氨基對(duì)三聯(lián)苯(>97.0%(GC))
CCL18 antibody [MM0142-7N58]原裝,、分裝4-氨基對(duì)三聯(lián)苯(>97.0%(GC))
MIP-3 beta/CCL19 antibody [MM0143-11B4]原裝,、分裝2-對(duì)三聯(lián)苯硼(含有數(shù)量不等的酐)
TNFSF18/GITRL antibody [MM0312-4Q25]原裝、分裝4-基對(duì)三聯(lián)苯(>95.0%(GC))
GDNF antibody [MM0308-12F9]原裝,、分裝4-基對(duì)三聯(lián)苯(>95.0%(GC))