詳細介紹
操作步驟:
1)使用前,,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),。每個標準品和空白孔建議做復(fù)孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔,。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi),。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A、B各50ul,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘。避免光照,。
8)取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果,。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
Human Creatine Kinase, CK Elisa Kit | YS-H6997 |
試劑和樣本的控制方法:
一、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān),,我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證”,每一個產(chǎn)品都有對應(yīng)的批號,,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,不必擔心會有過期的試劑,。我司的試劑,,值得您選擇。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,,在室溫下放置20-30 min后,,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應(yīng)微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求,。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子,、補體,、高濃度的非特異免疫球蛋白、異嗜性抗體,、某些自身抗體等,;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,;
③檢測抗原時,,可用加入到標本稀釋液中使RF降解;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本,;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活,;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,,經(jīng)檢測后再低溫凍存,;保存時間不宜過久,檢測時盡量采用新鮮標本,;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,,并放入37℃水中1 h,待充分凝固后再離心分離血清,。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性,;
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型,;
五,、性價比非常好,節(jié)省實驗經(jīng)費,。
雷米普利(標準品)質(zhì)量規(guī)格:HPLC>98,標準品RamiprilONPG發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
基酞規(guī)格:HPLC≥98%;20mg訂購|咨詢ELISAKitforHumanProteinFAM214A小鼠糖原化酶B(PYGB)ELISA試盒,,英文名:PYGBELISAKit
滿山紅(興安杜鵑)FoliumRhododendriDaurici (XinganDuJuan)保存:-20℃規(guī)格:5g富含脯氨突觸相關(guān)蛋白SHANK3抗體
連翹酯苷E訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg核輸出蛋白5抗體CES1ELISAKit羧酯酶1(CES1)ELISA試盒
二鈉一水(ACS級)質(zhì)量規(guī)格:ACS級,>98.5%Sodiumphosphate,monobasic,monohydrate3%NaC1糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
環(huán)沙星雜質(zhì)ICiprofloxacin impurityI保存:-20℃規(guī)格:50mg基質(zhì)金屬蛋白酶20
L-絲氨質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRL-Serine鼠李糖桿菌LactobacillusrhamnosusCaSki,人宮頸細胞
高烏素規(guī)格:HPLC≥98%;20mg訂購|咨詢ELISAKitforHumanSerpinA11大鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)ELISA試盒,英文名:TNNI3ELISAKit
外消旋噻嗎洛爾-d5馬來鹽質(zhì)量規(guī)格:國進口racTimolol-d5MaleateUMR-106(大鼠骨肉瘤細胞)5×106cells/瓶×2
羥基基纖維素(30000mpa.s)質(zhì)量規(guī)格:30000mpa.s,BRHPMC,hydroxypropylmethylcelluloseNCI-H2087(人非小細胞肺腺細胞)鏈霉菌Streptomycessp.
富馬;Fumaricacid規(guī)格:20mg訂購|咨詢SKOV3[SK-OV-3],人卵巢腺細胞系
奧司明訂購|咨詢規(guī)格:100mg化雄激素受體抗體Thymosinβ4ELISAKit胸腺肽β4(Thymosinβ4)ELISA試盒
老鶴草訂購|咨詢規(guī)格:2g花生四(Arachidonicacid)ELISA試盒通用96T0.78-50ng/mL小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA試盒,,英文名:TGFβ2ELISAKit
C12E810%溶液質(zhì)量規(guī)格:BRC12E8大鼠正常腎成纖維細胞NRK-49F
CK elisa試劑盒Phospho-TSC2 (Thr1462)RICTOR延伸突觸蛋白1抗體
Phospho-Tuberin (Thr927)RelB紅細胞膜蛋白4.2抗體
phospho-Tau protein(Ser396)Rad17轉(zhuǎn)錄因子ELYS蛋白抗體
TNK1Phospho-Rad17 (Ser645)內(nèi)皮粘蛋白EMCN抗體
CDHF14C1orf149人膠質(zhì)細胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)免疫試盒
CLCA3CARKD人膠原交聯(lián)(PYD)免疫試盒
CD200RCDX1人降脂素(Adipsin)免疫試盒
CELA1C1QTNF8人降鈣素原(PCT)免疫試盒
c-KitC21ORF62人降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)免疫試盒
CD99L2phospho-CPLA2 (Ser505)人降鈣素(CT)免疫試盒
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應(yīng)的時間和溫度通常不做嚴格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,,待對照管顯色適當時,,即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,,但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵,。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度,、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。