詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:人皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱:Human Herpesvirus RTPCR
貨號:YS30904-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL,、200 µL、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應管,、眼科剪、眼科鑷,、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL,、200 µL,、1000 µL)、滅菌雙蒸水,。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1,、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3,、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標的保守序列設計的專一性引物,,與相關病毒無交叉反應。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,,可以達到幾百拷貝/反應,。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,,操作簡單,,定量準確快速,。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應體系的熒光定量 PCR,。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。
注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,,若為長期冷凍組織,應盡量避免反復凍融,,否則會導致模板的降解,,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,,易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預熱10 min,,以溶解沉淀,,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,,影響實驗結(jié)果,。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴增效率佳,。
5. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
Recombinant mouse MCP1 protein原裝,、分裝布
CCL21 antibody原裝,、分裝布
Recombinant mouse CCL21 protein原裝、分裝布(標準品)
Recombinant mouse CCL21 protein原裝,、分裝布
Recombinant mouse GRO alpha protein原裝、分裝布
Recombinant mouse GRO alpha protein原裝,、分裝布
MCP3 antibody原裝,、分裝布
Recombinant mouse MCP3 protein原裝、分裝布(標準品)
Macrophage Inflammatory Protein 1 gamma antibody原裝,、分裝托萘酯Diphtheria Toxin antibody原裝,、分裝CBZ-D-纈氨
Tetanus Toxin antibody原裝、分裝Z-Arg(Mtr)-OH·CHA
HIV1 gp120 antibody (HRP)原裝,、分裝Z-Arg(Mtr)-OH·CHA
HIV1 p24 antibody原裝,、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
Hyaluronic acid antibody原裝,、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
RhoGDI antibody原裝、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
Sigma1-receptor antibody - C-terminal原裝,、分裝N-CBZ-D-氨
Native Ovalbumin protein (HRP)原裝,、分裝N-CBZ-D-氨
Recombinant Human 14-3-3 gamma/YWHAG protein原裝、分裝N-CBZ-D-氨
人皰疹病毒通用PCR檢測試劑盒說明書Recombinant human MEK1 (mutated S218 + S222) protein原裝,、分裝1,1'-二芐基-4,4'-聯(lián)吡啶鎓鹽二氯化物水合物(>98.0%(HPLC))
Recombinant human CSNK2A2 protein原裝,、分裝1,1'-二芐基-4,4'-聯(lián)吡啶鎓鹽二氯化物水合物(>98.0%(HPLC))
MAP3K15/ASK3 antibody原裝、分裝1,1'-二芐基-4,4'-聯(lián)吡啶鎓鹽二氯化物水合物(>98.0%(HPLC))
HIV1 p24 antibody原裝,、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
Hyaluronic acid antibody原裝,、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
RhoGDI antibody原裝、分裝CBZ-L-賴氨酯鹽鹽;N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酯鹽鹽
ULBP1 antibody原裝,、分裝1,1'-二苯基-4,4'-二氯化聯(lián)吡啶鎓(>97.0%(HPLC)(T))
OAS2 antibody原裝,、分裝1,1'-二基-4,4'-二氯化聯(lián)吡啶鎓(>98.0%(HPLC)(T))
FBXO33 antibody原裝、分裝1,1'-二基-4,4'-二氯化聯(lián)吡啶鎓(>98.0%(HPLC)(T))
Recombinant cow Rab3C protein原裝,、分裝3,3-二苯基-3H-萘并[2,1-b]吡喃(>98.0%(HPLC))
Recombinant human RAB4B protein原裝,、分裝2,5-降冰片二烯(含穩(wěn)定BHT)(>97.0%(GC))
ID2 antibody [OTI10C3]原裝、分裝2,5-降冰片二烯(含穩(wěn)定BHT)(>97.0%(GC))
使用方法:
一,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照,。
2. 標記 6 個離心管,,分別為 7,6,,5,,4,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。