詳細介紹
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,,不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標本后和加結(jié)合物后,應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱,。
2.各ELISA板不應疊在一起,。
3.為避免蒸發(fā),板上應加蓋,,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中,。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求,。 如室溫高于20℃,,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,,待對照管顯色適當時,,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,,但卻 是決定實驗成敗的關鍵,。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色,。
2.如用酶標儀測定結(jié)果,,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法,。
產(chǎn)品名稱 | Human Collagenase I elisa試劑盒 |
英文名稱 | Human Collagenase I Elisa Kit |
規(guī)格 | 48T/96T |
試劑和樣本的控制方法:
一,、試劑
1.試劑的選擇:國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關,我司嚴格按照進行,,已獲得國家承認的“三證”,,每一個產(chǎn)品都有對應的批號,只要客戶提前下單,,我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品,,不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑,,值得您選擇,。
2.試劑的準備:先將試劑盒先從冰箱中拿出來,在室溫下放置20-30 min后,,再進行測定,使試劑盒在使用前與室溫平衡,,這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度,,以滿足后面的測定需求。
二,、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素:包括類風濕因子,、補體、高濃度的非特異免疫球蛋白,、異嗜性抗體,、某些自身抗體等;
類風濕因子的控制方法:
①用F(ab)2替代完整的IgG,;
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理,;
③檢測抗原時,可用加入到標本稀釋液中使RF降解,;
補體的控制方法:
①用EDTA稀釋標本,;
②56℃ 30 min加熱血清使C1q滅活;
2.外源性干擾因素:包括標本溶血,、細菌污染,、保存時間過長或凝固不全等;
控制方法:采血時規(guī)范操作,,采集的血液勿用力震蕩,,以防溶血;收集標本時采用無菌試管,經(jīng)檢測后再低溫凍存,;保存時間不宜過久,,檢測時盡量采用新鮮標本;對于凝固不全的血標本可適當加入抗凝劑,,并放入37℃水中1 h,,待充分凝固后再離心分離血清。
操作步驟:
1)使用前,,將所有試劑充分混勻,。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,,產(chǎn)生加樣上的誤差,。
2)根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標準品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標準品和空白孔建議做復孔,。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定,,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內(nèi),。
3)加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔,、加入待測樣品50ul于反應孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標記的抗體,。蓋上膜板,,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時,。
4)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,,洗滌次數(shù)增加一次。
5)每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育30分鐘。
6)甩去孔內(nèi)液體,,每孔加滿洗滌液,,振蕩30秒,甩去洗滌液,,用吸水紙拍干,。重復此操作3次,。如果用洗板機洗滌,洗滌次數(shù)增加一次,。
7)每孔加入底物A,、B各50ul,輕輕振蕩混勻,,37℃溫育10分鐘,。避免光照。
8)取出酶標板,,迅速加入50ul終止液,,加入終止液后應立即測定結(jié)果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值,。
具有如下優(yōu)點:
一,、高效、靈敏,、特異的抗體,;
二、穩(wěn)定的重復性和可靠性,;
三,、吸附性能好,空白值低,,孔底透明度高的固相載體,;
四、適用血清,、血漿,、組織勻漿液,、細胞培養(yǎng)上清液,、尿液等等多種標本類型;
五,、性價比非常好,,節(jié)省實驗經(jīng)費。
高烏素訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mgELISAKitforHumanFructose-bisphosphatealdolaseC小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)ELISA試盒,,英文名:IGFBP-4ELISAKit
BOC-D-絲氨酯質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRBOC-D-Serinemethylester潮濕纖維單胞菌Cellulomonasuda大鼠視網(wǎng)膜muller細胞
多利培南質(zhì)量規(guī)格:國進口Doripenem人胚腎細胞AAV-293
訂購|咨詢規(guī)格:50mg脂?;D(zhuǎn)移酶2抗體CD28ELISAKitCD28分子(CD28)ELISA試盒
澳洲茄訂購|咨詢規(guī)格:20mg淋巴細胞抗原抗體Ly6c抗體GADELISAKit谷氨脫羧酶(GAD)ELISA試盒
脫海;Dehydroglauci規(guī)格:20mg訂購|咨詢GH3(大鼠垂體瘤細胞)5×106cells/瓶×2
酯訂購|咨詢規(guī)格:1mlELISAKitforHumanHornerin小鼠多功能蛋白聚糖(VS)ELISA試盒,英文名:VSELISAKit
5-((2R,3R)-2,3-二-7-訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg/vial組蛋白去?;?抗體MOGAT3ELISAKit單酰甘油-O-?;D(zhuǎn)移酶3(MOGAT3)ELISA試盒
羧芐西林鈉(標準品)質(zhì)量規(guī)格:含量測定,標準品Carbenicillindisodium西蒙氏檸檬鹽培養(yǎng)基規(guī)格:100g用途:用于腸道菌的檸檬鹽利用試驗
拉呋替Lafutidine保存:-20℃規(guī)格:100mgPCID2蛋白抗體
α-三聯(lián)訂購|咨詢規(guī)格:HPLC≥98%;20mg高嗜性粒細胞綜合癥相關蛋白FIP1L1抗體MELKELISAKit母系胚胎亮氨拉鏈蛋白激酶(MELK)ELISA試盒
維達列汀;維格列汀質(zhì)量規(guī)格:>98.5%,BRVildagliptin無翅型MMTV整合位點家族成員1(WNT1)重組蛋白RecombinantWinglessTypeMMTVIntegrationSiteFamily,Member1(WNT1)
?;?Taurine訂購|咨詢規(guī)格:20mg胞漿接頭蛋白Dok6抗體AGERELISAKit晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(AGER)ELISA試盒
1-基因訂購|咨詢規(guī)格:20mgELISAKitforHumanATP-bindingcassettesub-familyBmember5小鼠胰島素原(PI)ELISA試盒,,英文名:PIELISAKit
Human Collagenase I elisa試劑盒phospho-VAV3(Tyr173)phospho-Src(Tyr418)Fas活化的絲/蘇激酶抗體
VEGFSTAC2脆性組三聯(lián)體抗體
MPP6SOX30纖維母細胞表面蛋白抗體
VAV3SLAIN1前列腺素E受體4相關蛋白抗體
CHAC1phospho-CHEK1(Ser317)人抗肽(CAMP)免疫試盒
CIDE Aphospho-CDKN2A (Ser140)人抗肽(Attacin)免疫試盒
CIDE Bphospho-CDKN2A (Ser152)人抗巨細胞病毒(CMV)抗體(IgM)免疫試盒
CRR9phospho-CDKN2A (Ser8)人抗巨細胞病毒(CMV)抗體(IgG)免疫試盒
C22orf40phospho-CREB-1(Ser129)人抗巨噬細胞抗體(anti-macrophage Ab)免疫試盒
CCL26phospho-CSF2RB (Tyr766)人抗酒石性酶5b(TRACP-5b)免疫試盒