詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:腔闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格
英文名稱:Eurytrema coelomaticumPCR
貨號:YS30753-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2,、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3,、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽性對照。放冰上待用,。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級,,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,,操作簡單,,定量準(zhǔn)確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,,避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷,。
注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率,。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,,易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,,以溶解沉淀,,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時(shí),,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,電泳時(shí)會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳,。
?5. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Fibronectin antibody (Biotin)原裝,、分裝D-賴氨 S20399 1g 428 923-27-3
Collagen IV antibody原裝,、分裝維生素系列及其衍生物系列現(xiàn)貨
Collagen VI antibody原裝、分裝氨基
beta 2 Microglobulin antibody原裝,、分裝D-脯氨 S20072 10g 50 344-25-2
GST antibody原裝,、分裝D-亮氨 S20045 5g 60元 328-38-1
Salivary alpha amylase antibody原裝、分裝L-異亮氨 B21937 200mg 60元 73-32-5
Carbonic Anhydrase 1/CA1 antibody原裝,、分裝L-谷氨酰胺 B21917 200mg 90 56-85-9
CD14 antibody [UCHM1]原裝,、分裝L-組氨 B21938 200mg 60元 71-00-1
CD62E antibody [1.2B6]原裝、分裝司谷氨 S47541 25mg 2223 4910-46-7MED26 antibody [2216C1a]原裝,、分裝β-半乳糖苷酶
CSRP2BP antibody [2221C4a]原裝,、分裝脫落(標(biāo)準(zhǔn)品)
CTDSP2 antibody [2230C1a]原裝、分裝脫落(高純)
D Box Binding Protein antibody [DBP5H08]原裝,、分裝脫落(高純)
Rabbit Guinea pig IgG H&L (TRITC)原裝,、分裝脫落,S-誘抗素; 壯芽靈
TMED4 antibody原裝、分裝脫落,S-誘抗素; 壯芽靈
EGR4 antibody原裝,、分裝胃蛋白酶(1:3000)
ADAMTS6 antibody原裝,、分裝胃蛋白酶(1:3000)
Endothelin B Receptor/ET-B antibody原裝、分裝核糖核酶A(sigma)
腔闊盤吸蟲PCR檢測試劑盒規(guī)格ID2 antibody原裝,、分裝N-二,S-?;鶐€基二醇酯(>98%,BR)
CtBP1 antibody原裝、分裝水楊醇(>98%,BR)
SASS6 antibody原裝,、分裝SATA
Kinetochore antibody原裝,、分裝SB3-18
FOXK1/MNF antibody原裝、分裝SefinoseTM 4 Fast Flow瓊脂糖
CAMSAP1 antibody原裝、分裝瓊脂糖凝膠
CAMSAP1 antibody原裝,、分裝氧化硒(>98%,Pract Grade)
ELK4 antibody原裝,、分裝芝麻酚(>98%,BC)
ESCO2 antibody原裝、分裝Sfr274I