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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
肝片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度,。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列,， 就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
詳細(xì)介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器,、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器（2 µL、20
µL,、200 µL,、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管,、吸頭（10 µL、200 µL,、1000 µL）,、滅菌雙蒸水。
參數(shù)規(guī)格：
產(chǎn)品名稱：肝片吸蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒價(jià)格
英文名稱：Fasciola hepaticaPCR
貨號(hào)：YS30759-R
產(chǎn)品規(guī)格：50T
產(chǎn)品運(yùn)輸：低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存：-20℃保存
產(chǎn)品有效期：一年
相對(duì)定量分析方法 ：
2-ΔΔCt
前提：目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100％且偏差在5％以內(nèi)
1,、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值：
ΔCT（test）= CT（target,test）-CT（ref,test）
ΔCT（calibrator）= CT（target,calibrator）-CT（ref, calibrator）
2,、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值：
ΔΔCT= ΔCT（test） - ΔCT（calibrator）
3、計(jì)算表達(dá)水平比率：
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一,、稀釋 PCR 陽(yáng)性對(duì)照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,，本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽(yáng)性對(duì)照,，只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽(yáng)性對(duì)照。
2. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,，分別為 7,，6,，5,，4,，3，2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液（用帶芯槍頭,，下同）。
4. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,，充分震蕩 1 分鐘,，得1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
5. 換槍頭,，在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘,，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用。
6. 換槍頭,，在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照到 5 號(hào)管中,，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽(yáng)性對(duì)照,。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的陽(yáng)性對(duì)照。放冰上待用,。
具有下列特點(diǎn)：
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,，與相關(guān)病毒無(wú)交叉反應(yīng)。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個(gè)數(shù)量級(jí),，可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
3.即開(kāi)即用，用戶只需要提供樣品模板,，操作簡(jiǎn)單,，定量準(zhǔn)確快速,。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測(cè)，避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR,。
6.本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷,。
注意事項(xiàng)：
1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織,，若為長(zhǎng)期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解,，影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,，易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,，以溶解沉淀，混勻后再使用,。
3. 電泳檢測(cè)時(shí),，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則,，電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi),，以便擴(kuò)增效率佳,。
?5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作,。
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