詳細(xì)介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:皮炎外瓶霉PCR檢測試劑盒規(guī)格
英文名稱:Exophiala dermatitidisPCR
貨號:YS30757-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2,、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3,、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng)。
3.即開即用,,用戶只需要提供樣品模板,,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速,。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,,避免后續(xù)污染。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR,。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷。注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,,否則會導(dǎo)致模板的降解,,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,,易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,以溶解沉淀,,混勻后再使用,。
3. 電泳檢測時,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),,以便擴(kuò)增效率佳。
?5. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作,。
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MetRS/MARS antibody [MARSD10B4]原裝,、分裝DL-對苯基氨
ThrRS antibody [TARSF8H3]原裝、分裝DL-對苯基氨
ABCF2 antibody [2001C1]原裝,、分裝3-延胡素氨基腈酯
Cyclin F antibody [2123D1a]原裝,、分裝輔羧酶;羧化輔酶;焦胺素
CA150 antibody [TCEAD79A]原裝、分裝輔羧酶;羧化輔酶;焦胺素
Ocular development associated gene antibody [GATA9A1D3]原裝,、分裝輔羧酶;羧化輔酶;焦胺素
ASXL1 antibody [2049C2a]原裝,、分裝吲哚酯
皮炎外瓶霉PCR檢測試劑盒規(guī)格ARIP4 antibody原裝、分裝鉍鈉(>80%,BC)
IQGAP1 antibody原裝,、分裝鉍鈉(>80%,BC)
PDLIM7 antibody原裝,、分裝氯鈉(>98%,BR)
Rho guanine exchange factor 16/NBR antibody原裝、分裝泛影鈉(>98%,BC)
PDLIM7 antibody原裝、分裝醇鈉(>80%,BR)
THOC5 antibody原裝,、分裝氟鋁鈉(>98%,BR)
GBF1 antibody原裝,、分裝氟硅鈉(>98%,BC)
QSER1 antibody原裝、分裝亞鐵化鈉(>98%,BC)
ch TOG antibody原裝,、分裝馬尿鈉(>98%,BR)
使用方法:
一,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。