詳細(xì)介紹
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī),、熒光 PCR 擴(kuò)增儀,、組織研磨器、-20 ℃冰箱,、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL、200 µL,、1000 µL),。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪,、眼科鑷,、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL,、200 µL、1000 µL),、滅菌雙蒸水,。
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:枝孢霉通用PCR檢測試劑盒說明書
英文名稱:Cladosporium spp.PCR
貨號:YS30577-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運(yùn)輸:低溫運(yùn)輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標(biāo)序列和內(nèi)參序列的擴(kuò)增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標(biāo)基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2,、用校準(zhǔn)樣本的ΔCT值歸一試驗(yàn)樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3,、計(jì)算表達(dá)水平比率:
2 –ΔΔCT=表達(dá)量的比值
使用方法:
一,、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分),。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照,。
2. 標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,,6,,5,4,,3,,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用。
5. 換槍頭,,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。
具有下列特點(diǎn):
1.根據(jù) 指標(biāo)的保守序列設(shè)計(jì)的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達(dá)到幾百拷貝/反應(yīng),。
3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,,操作簡單,,定量準(zhǔn)確快速,。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR,。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷,。注意事項(xiàng):
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,,若為長期冷凍組織,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,,否則會導(dǎo)致模板的降解,,影響PCR效率。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,,易產(chǎn)生沉淀,。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,,以溶解沉淀,,混勻后再使用。
3. 電泳檢測時,,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果,。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率佳,。
?5. 為了您的安全和健康,,請穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。
Bcl-2 antibody [100/D5]原裝,、分裝血球凝集素
MUC16 antibody [OC125]原裝,、分裝高親和力血球凝集素
COX1 / Cyclooxygenase 1 antibody [5F6/F4]原裝、分裝鼠單克隆抗體
MUC16 antibody [OV185:1]原裝,、分裝siRNA轉(zhuǎn)染試
CD3 antibody [PS1]原裝,、分裝L-蘋果脫酶
Calponin 1 antibody [CALP]原裝、分裝植物凝膠
COX2 / Cyclooxygenase 2 antibody [5E10/D10]原裝,、分裝蛋白胨
Calretinin antibody原裝,、分裝胰蛋白胨
Prion protein PrP antibody原裝、分裝胰蛋白胨(OXOID)Recombinant human PTPN12 protein原裝,、分裝氯苯(for HPLC, ≥99.5%)
Recombinant human PTPN13/FAP-1 protein原裝,、分裝1,3-二基-2-咪唑啉(用于GC-HS,≥99.8%(GC))
Recombinant human VE-PTP protein原裝、分裝1,3-二基-2-咪唑啉(用于GC-HS,≥99.8%(GC))
Recombinant human CD45 protein原裝,、分裝二基亞砜(農(nóng)殘級)
Recombinant human LAR protein原裝,、分裝二基亞砜(農(nóng)殘級)
Recombinant human PTPRG protein原裝,、分裝鄰苯二二酯(色譜固定液)
Recombinant human DEP1 protein原裝、分裝十二基三基氯化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級)
Recombinant human PTPRM protein原裝,、分裝正庚(農(nóng)殘級,≥99%(GC))
Recombinant Human ICA 512/PTPRN protein原裝,、分裝正庚(農(nóng)殘級,≥99%(GC))
枝孢霉通用PCR檢測試劑盒說明書CPA4 antibody原裝、分裝人體免疫缺陷病毒-gp120-片段(421-438)
KHDRBS3 antibody原裝,、分裝人體免疫缺陷病毒-gp41-抗原肽5
Recombinant human MMP2 protein (Active)原裝,、分裝人體免疫缺陷病毒-gp41-片段
Nucleophosmin (phospho T199) antibody [EP1857Y]原裝、分裝人體免疫缺陷病毒整合酶抑制(1)
Nucleophosmin (phospho T199) antibody [EP1857Y]原裝,、分裝人體免疫缺陷病毒Nef(90-100)
Nucleophosmin (phospho T199) antibody [EP1857Y]原裝,、分裝人體免疫缺陷病毒蛋白酶底物
CPSF1 antibody原裝、分裝人體免疫缺陷病毒QK10
CPSF2/CPSF100 antibody原裝,、分裝HJ抑制肽
CPSF2/CPSF100 antibody原裝,、分裝人乳頭狀瘤病毒-E6-C