詳細介紹
參數(shù)規(guī)格:
產(chǎn)品名稱:豬瘟病毒疫苗株P(guān)CR檢測試劑盒規(guī)格
英文名稱:Classical Swine Fever VirusVaccine(CSFVVaccine)RTPCR
貨號:YS30580-R
產(chǎn)品規(guī)格:50T
產(chǎn)品運輸:低溫運輸
產(chǎn)品保存:-20℃保存
產(chǎn)品有效期:一年
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平,、離心機、熒光 PCR 擴增儀,、組織研磨器,、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL,、20
µL,、200 µL,、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管,、眼科剪,、眼科鑷、生理鹽水,、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管,、吸頭(10 µL、200 µL,、1000 µL),、滅菌雙蒸水。
相對定量分析方法 :
2-ΔΔCt
前提:目標序列和內(nèi)參序列的擴增效率接近100%且偏差在5%以內(nèi)
1,、用內(nèi)參基因的CT值歸一目標基因的CT值:
ΔCT(test)= CT(target,test)-CT(ref,test)
ΔCT(calibrator)= CT(target,calibrator)-CT(ref, calibrator)
2,、用校準樣本的ΔCT值歸一試驗樣本的ΔCT值:
ΔΔCT= ΔCT(test) - ΔCT(calibrator)
3、計算表達水平比率:
2 –ΔΔCT=表達量的比值
具有下列特點:
1.根據(jù) 指標的保守序列設(shè)計的專一性引物,,與相關(guān)病毒無交叉反應(yīng),。
2.靈敏度比常規(guī) PCR 高 2-3 個數(shù)量級,可以達到幾百拷貝/反應(yīng),。
3.即開即用,,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,,定量準確快速。
4.一管式熒光定量 PCR 檢測,,避免后續(xù)污染,。
5.本試劑盒足夠 50 次 20μL 反應(yīng)體系的熒光定量 PCR。
6.本產(chǎn)品只適用于科研,,不能用于臨床診斷,。注意事項:
1. 建議使用新鮮采取的動物組織,若為長期冷凍組織,,應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融,,否則會導(dǎo)致模板的降解,影響PCR效率,。
2. 試劑Buffer AL若低溫保存,,易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時間,,也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min,,以溶解沉淀,混勻后再使用,。
3. 電泳檢測時,,切勿使用含有SDS的Loading Buffer,。否則,電泳時會在泳道中出現(xiàn)一大團拖尾亮帶,,影響實驗結(jié)果,。
4. 建議擴增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴增效率佳,。
?5. 為了您的安全和健康,,請穿實驗服并佩戴一次性手套操作。
beta 2 Microglobulin antibody [B2M-01]原裝,、分裝精氨瓊脂糖凝膠4B
CD34 antibody [4H11(APG)]原裝,、分裝DEAE瓊脂糖凝膠FF
Transferrin antibody [HTF-14]原裝、分裝DEAE瓊脂糖凝膠CL-6B
Human IgG Fab fragment antibody [4A11]原裝,、分裝烯葡聚糖凝膠S-100 HR
HMW Cytokeratin antibody [34bE12]原裝,、分裝葡聚糖T5/葡聚糖D5/右旋糖酐5
Von Willebrand Factor antibody [F8/86]原裝、分裝葡聚糖凝膠/Sephadex
Hairy Cell Leukemia antibody [DBA.44]原裝,、分裝酵母粉(OXOID)LP0021
Lambda Light chain antibody [N10/2]原裝,、分裝胰蛋白胨(OXOID)LP0042
CD45 antibody [PD7/26 + 2B11]原裝、分裝IPGphor Strip Holder Cleaning SolutionHuman CREB peptide原裝,、分裝季戊(色譜固定液,150℃)
Human EAAT1 peptide原裝,、分裝正醇(農(nóng)殘級)
AE2 antibody原裝、分裝正醇(農(nóng)殘級)
ARHGEF5 antibody原裝,、分裝異苯酯(99%,用于HPLC標記)
Collagen XI alpha 2/COL11A2 antibody原裝,、分裝正戊(農(nóng)殘級)
BSD peptide原裝、分裝正戊(農(nóng)殘級)
Active human IKB alpha (phospho Y42) peptide原裝,、分裝聚酰胺粉(柱層析用)
Active human IKB alpha (phospho Y305) peptide原裝,、分裝(色譜級, 85-90%)
Active human Integrin beta 4 (phospho Y1494) peptide原裝、分裝(色譜級, 85-90%)
豬瘟病毒疫苗株P(guān)CR檢測試劑盒規(guī)格DDDDK tag (Binds to FLAG® tag sequence) antibody [M2] (Alkaline Phosphatase)原裝,、分裝援木蛙肽
HA tag antibody [16B12] (Alkaline Phosphatase)原裝,、分裝高鈣血癥惡性子(1-34)酰胺,人
Myc tag antibody [9E10] (Biotin)原裝,、分裝高鈣血癥惡性子(1-34),, 人
T7 tag® antibody (Biotin)原裝、分裝高鈣血癥惡性子(1-40)
VAP1 antibody [7-88]原裝,、分裝高鈣血癥惡性子(7-34)酰胺,,人
TJP2/ZO2 antibody原裝、分裝Hypertrehalosaemic 神經(jīng)肽,,玉米夜蛾
Elafin/ESI antibody [TRAB2O]原裝,、分裝Hypertrehalosaemic 神經(jīng)肽,灰色蟑螂
Elafin/ESI antibody [TRAB2F]原裝、分裝下視丘分泌素(70-98),,人
SLC38A9 antibody原裝,、分裝I-309 (人)
使用方法:
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染原,,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,,只提供可以直接使用的 DNA 段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,,分別為 7,,6,5,,4,,3,2,。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液(用帶芯槍頭,,下同),。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照,。放冰上待用,。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,,充分震蕩 1 分鐘,,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用,。
7. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照,。放冰上待用。