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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7001 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
豬脂肪間充質(zhì)干分離自脂肪組織,；脂肪組織主要由大量群集的脂肪細(xì)胞構(gòu)成,，聚集成團(tuán)的脂肪細(xì)胞由薄層疏松結(jié)締組織分隔成小葉；貯存的脂肪,，在需要時(shí)可迅速分解成甘油和脂肪酸，經(jīng)血液輸送到各組織以供利用,。它們影響胰島素敏感性,、血壓水平、內(nèi)皮功能,、纖溶活動(dòng)及炎癥反應(yīng),，參與多種重要病理生理過程；脂肪組織已由過去單純作為能量?jī)?chǔ)存的器官而成為一個(gè)極其重要的內(nèi)分泌系統(tǒng),。脂肪組織中也存在一些干細(xì)胞群,，具有自我更新能力和多向分化潛能，被稱為脂肪組織來源的間充質(zhì)干細(xì)胞,，簡(jiǎn)稱脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞,。與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞相比，在來源,、細(xì)胞群特點(diǎn)以及分化潛能等多方面極為相似,。但是，脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞更易獲得足夠數(shù)量的細(xì)胞,，且獲取過程中對(duì)機(jī)體損傷更小,，是更為理想的自體干細(xì)胞源。脂肪組織分離得到脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞以梭形為主要形態(tài),，BrdU可標(biāo)記其細(xì)胞核,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬脂肪間充質(zhì)干采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的豬脂肪間充質(zhì)干經(jīng)CD90免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠補(bǔ)體成分5 英文名稱： Mouse Compleme Compone 5 規(guī)格： 英文縮寫： C5
小鼠結(jié)締組織生長(zhǎng)因子 英文名稱： Mouse Connective Tissue Growth Factor 規(guī)格： 英文縮寫： CTGF
小鼠皮質(zhì) 英文名稱： Mouse Coicosterone 規(guī)格： 英文縮寫： CO
小鼠肌酐 英文名稱： Mouse Creatinine 規(guī)格： 英文縮寫： CT
小鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat soluble receptor activator of nuclear factor kappa B ligand (sRANKL) ELISA Kit 大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒
Humaecombinationactivatinggene1,RAG-1ELISAKit 人重組激活基因1(RAG-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物賴(lysine)含量化學(xué)比色法定量試劑盒20次
HumanVitaminB6,，VB6ELISAKit人B6(VB6)試劑盒規(guī)格：96T/48T
PE-Cy5標(biāo)記人CD62E/CD62P單克隆抗體
環(huán)指蛋白207抗體
CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein
DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原
IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein
ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
DAD1 (dopamine D1 receptor 1mgDAD1 (dopamine D1 receptor) 多巴胺受體-D1抗原
ENTPD3 Protein Human 重組人 ENTPD3 / NTPDase3 / CD39L3 蛋白
CDH13重組大鼠 CDH13 / Cadherin-13 / H Cadherin 蛋白 Protein
C Protein Mouse 重組小鼠 C / SLAMF2 / BCM1 蛋白
IL16重組人 IL16 / Interleukin-16 蛋白 Protein
豬脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠叉頭框蛋白P3(FoxP3)試劑盒 ,，英文名： FoxP3 ELISA Kit
Mouse L phenylalanine ammonia lyase (PAL) ELISA Kit 小鼠L苯解氨酶(PAL)試劑盒
ELISA 小鼠粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子(mouse GM-CSF) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLDH(HumanLactateDehydrogenase)ELISAKit人乳酸脫氫酶
通用型N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性高效液相層析法(HPLC)定量試劑盒20次
ELISAKitIFN-γ猴γ干擾素
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長(zhǎng),；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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