詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脂肪組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7664 |
細胞簡介:
小鼠棕色脂肪干分離自棕色脂肪組織,;動物體內(nèi)存在棕色和白色兩種脂肪,白色脂肪堆積在皮下,,負責(zé)儲存多余熱量,;棕色脂肪負責(zé)分解引發(fā)肥胖的白色脂肪,將后者轉(zhuǎn)化成二氧化碳,、水和熱量,,本身不儲存熱量。棕色脂肪組織呈棕色,,其特點是組織中有豐富的毛細血管,,脂肪細胞內(nèi)散著許多小脂滴,線粒體大而豐富,核圓形,,位于細胞中央,,這種脂肪細胞也稱為多泡脂肪細胞。棕色脂肪組織在成年動物極少,,新生兒及冬眠動物較多,,在新生兒主要分布在肩胛間區(qū)、腋窩及頸后部等處,。棕色脂肪組織僅在嬰兒時期發(fā)揮作用,它們堆積在新生兒肩胛處,,幫助維持體溫,。隨著年齡增長,棕色脂肪會逐漸消失,。最終,,動物體內(nèi)只殘存少量棕色脂肪細胞,分布于頸部和鎖骨,。脂肪干細胞(ADSCs)是一種具有多向分化潛能的干細胞,,主要恢復(fù)組織細胞的修復(fù)功能,促進細胞的再生,,恢復(fù)年輕面容的同時,,身體機能也得到充分改善,有效改善亞健康,、早衰等疾病,,由內(nèi)而外真正的有效抵抗衰老。脂肪干細胞具有很多優(yōu)點:①具有自我更新及多向分化的潛能,;②來源充足,;③對供區(qū)的創(chuàng)傷較小,;④獲得率及體外擴增速率高,。脂肪干細胞是目前被廣泛應(yīng)用于組織工程領(lǐng)域中理想的種子細胞。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠棕色脂肪干經(jīng)CD29,、CD44免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
兔子可溶性P選擇素(sP-selectin)試劑盒 96T/48T
兔子可溶性E選擇素(sE-selectin)試劑盒 96T/48T
兔子抗中性粒細胞顆??贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T
兔子巨噬細胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒 96T/48T
小鼠白介素28(IL-28)試劑盒 96T/48T
Rat chorionic gonadoophin (CG) ELISA Kit 大鼠絨毛膜(CG)試劑盒
Humansolublereceptoractivatorofnuclearfactor-kBligand,sRANKLELISAKit 人可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humancarbonicanhydrase2,CA-2試劑盒人酶2(CA-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
重組腺病毒包裝試劑盒1套
HumansolubleendothelialproteinCreceptor,sEPCRELISAKit人可溶性血管內(nèi)皮細胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒規(guī)格:96T/48T
NAD(P)H 苯醌脫氫酶 2抗體
核輸出蛋白5抗體
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標(biāo)簽) Protein
Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原 0.5mgTie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
GGT5 Protein Human 重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)
LDLR Protein Human 重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白
Tie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原 0.5mgTie1/JTK14 peptide 上皮生長因子樣域酪激酶1抗原
GGT5 Protein Human 重組人 GGT5 / GGTLA1 蛋白 (ECD, His 標(biāo)簽)
GP140重組人類免疫缺陷病毒Ⅰ型 HIV-1 gp140 蛋白 (group M, subtype CRF07_BC) (Fc 標(biāo)簽) Protein
LDLR Protein Human 重組人 LDLR / LDL Receptor 蛋白
IL18RAP重組人 IL18RAP / IL1R7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠棕色脂肪干細胞大鼠成纖維細胞生長因子10(FGF10)試劑盒 ,,英文名: FGF10 ELISA Kit
Mouse C reactive protein (CRP) ELISA Kit 小鼠C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒
ELISA 小鼠肌酸激酶(mouse CK) 進口分裝
CLIAKitforLensculinarisagglinin,LCAELISAKit扁豆凝集素
通用型HSV2(HERPESSIMPLX2)病毒定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitapo-A1猴載脂蛋白A1