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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
子宮 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8080 |
細(xì)胞簡介：
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)分離自子宮組織,；子宮是孕育胎兒的器官，位于盆腔中部,，膀胱與直腸之間,，其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持，這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時,，可以引起子宮脫垂,。子宮內(nèi)膜即黏膜，由上皮（屬單層柱狀上皮,，有分泌細(xì)胞和纖毛細(xì)胞二種）和固有膜（由結(jié)締組織構(gòu)成,，其內(nèi)有大量的星形細(xì)胞，稱為基質(zhì)細(xì)胞）組成,，子宮內(nèi)膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,，功能層較厚，約占內(nèi)膜厚度的4/5,；基底層較薄較致密,，約占1/5，功能層可剝脫,，而基底層不可剝脫,。子宮內(nèi)膜構(gòu)成雌性哺乳動物子宮壁的最內(nèi)層，位于子宮腔面,，在動物生殖生理活動中占有重要地位,。子宮和子宮內(nèi)膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官，子宮內(nèi)膜的再生修復(fù)是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細(xì)胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進(jìn)行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長,；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行,。
方法簡介：
實驗室分離的小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)采用膠原酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
實驗室分離的小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳2-3代左右
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細(xì)胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子結(jié)合蛋白4(RBP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔子主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/RLAⅢ)ELISAKit ELISA. 96T/48T
兔淋巴細(xì)胞功能相關(guān)抗原3(LFA-3/CD58)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠β內(nèi)酰胺酶抑制劑(BLI)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat somatostatin (SS) ELISA Kit 大鼠(SS)試劑盒
HumanCollagenaseIELISAKit 人膠原酶I(CollagenaseI)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanCeruloplasmin,CP/CER試劑盒人銅藍(lán)蛋白(CP/CER)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON810品系試劑盒20次
HumanSerotonin,STELISAKit人血清素/血清胺(ST)試劑盒規(guī)格：96T/48T
LYPD3抗體
過氧化氫誘導(dǎo)轉(zhuǎn)錄蛋白1抗體
IFNA2重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 Protein
IRF-1(Interferon regulatory factor-1 0.5mgIRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原
FLRT2重組人 FLRT2 蛋白 Protein
GPNMB Protein Human 重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IRF-1(Interferon regulatory factor-1 0.5mgIRF-1(Interferon regulatory factor-1) 干擾素調(diào)節(jié)因子抗原
GPNMB Protein Human 重組人 GPNMB / Osteoactivin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IFNA2重組食蟹猴 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 Protein
IFNA2 Protein Mouse 重組小鼠 IFNA2 / Interferon alpha 2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FLRT2重組人 FLRT2 蛋白 Protein
小鼠子宮內(nèi)膜間質(zhì)細(xì)胞大鼠成纖維細(xì)胞生長因子23(FGF-23)試劑盒 ，英文名： FGF-23 ELISA Kit
Mouse B cell lymphoma factor 2 (Bcl-2) ELISA Kit 小鼠B細(xì)胞淋巴瘤因子2(Bcl-2)試劑盒
ELISA 小鼠可溶性白細(xì)胞分化抗原40配體(mouse sCD40L) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforLepIgG(HumanLeptospiraIgG)ELISAKit人鉤端IgG
通用型HSV(HERPESSIMPLX)病毒定量PCR擴(kuò)增試劑盒20次
ELISAKitIL-1白介素1
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