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產(chǎn)品名稱：小鼠椎間盤髓核細胞

組織來源：椎間盤組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每3-4天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3-5代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%

細胞簡介：

小鼠椎間盤髓核分離椎間盤組織,；椎間盤是位于脊柱兩椎體之間,，分為中央部的髓核，富于彈性的膠狀物質,；周圍部的纖維環(huán),，由多層纖維軟骨環(huán)按同心圓排列。上下有軟骨板,，是透明軟骨復蓋于椎體上,，下面骺環(huán)中間的骨面。上下的軟骨板與纖維環(huán)一起將髓核密封起來,。纖維環(huán)由膠原纖維束的纖維軟骨構成,，位于髓核的四周。纖維環(huán)的纖維束相互斜行交叉重疊,，使纖維環(huán)成為堅實的組織，能承受較大的彎曲和扭轉負荷,。髓核,，是乳白色半透明膠狀體，富于彈性,，為椎間盤結構的一部分,，位于兩軟骨板與纖維環(huán)之間。由縱橫交錯的纖維網(wǎng)狀結構即軟骨細胞和蛋白多糖黏液樣基質構成的彈性膠凍物質,。嬰幼兒時期的髓核含水量為80%-90%,，即使到了老年，其含水量也在70%上下,。髓核在出生時體積大而松散,，位于椎間盤的中央，至成年時位置移至椎間盤的中后部,；在成年以前構成髓核的主要物質是大量蛋白多糖復合體,、膠原纖維和纖維軟骨，隨著年齡的增長，髓核中的蛋白多糖解聚增多,，水分逐漸減少,，膠原增粗并逐漸被纖維軟骨所替代。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核采用膠原酶-混合消化法并結合軟骨細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠椎間盤髓核經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一,、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液，補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或將細胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。

二,、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,，將細胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b）,、對于懸浮細胞,，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起,，將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：

土壤堿性蛋白酶   可見分光光度法   50管/24樣

FDA水解酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

土壤酸性蛋白酶試劑盒   可見分光光度法   50管/24樣

土壤漆酶測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

小鼠17-酮類固醇(17-KS)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human gasin (Gasin) ELISA Kit 人胃泌素(Gasin)試劑盒

Humanandrogeeceptor,ARELISAKit 人雄激素受體(AR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancoicoopin-releasingfactor,CRF人促腎上腺皮質激素釋放因子(CRF)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織CK2α激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanproteinkinaseC，PKCELISAKit人蛋白激酶C(PKC)試劑盒規(guī)格：96T/48T

Intersectin 2抗體

高遷移率族蛋白2重組兔單克隆抗體

PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原

TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein

IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)

SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白

CK7(Cytokeratin 7 0.5mgCK7(Cytokeratin 7)human 細胞角蛋白7抗原

IFNA7 Protein Human 重組人 Interferon alpha 7 / IFNA7 蛋白 (Fc 標簽)

PVR重組小鼠 CD155 / PVR 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein

SCARB1 Protein Mouse 重組小鼠 SCARB1 / CD36L1 / CLA-1 蛋白

TSC22D1重組人 TSC22D1 蛋白 Protein

小鼠椎間盤髓核細胞大鼠垂草扁桃酸(VMA)試劑盒 ,，英文名： VMA ELISA Kit

Mouse 6 keto prostaglandin (6-K-PG) ELISA Kit 小鼠6酮前列腺素(6-K-PG)試劑盒

ELISA 小鼠環(huán)0酸鳥苷(mouse cGMP)  進口分裝

CLIAKitforLF/LTFAb-Ig(HumanLactoferrinaibodyIgG)ELISAkit人乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白抗體IgG

通用型HRP-AEC底物顯色試劑盒10次

ELISAKitCollagenaseI膠原酶I

收到細胞如何處理,？

1、首先,，觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時與技術支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,，部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時，以便穩(wěn)定細胞狀態(tài),。

3,、仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓毎螒B(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。

4、靜置完成后,，取出細胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)）,；建議細胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài),。

5、貼壁細胞：若細胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,，預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。

6,、懸浮細胞：將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,，若細胞密度超過80%，可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),，補加培養(yǎng)基至5ml,；若細胞密度未超過80%，將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作