化工儀器網(wǎng)
詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
臍帶組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7690 |
細(xì)胞簡介：
小鼠臍帶間充質(zhì)干分離自臍帶,；臍帶是哺乳類的連接胎兒和胎盤的管狀結(jié)構(gòu),。原來是由羊膜包卷著卵黃囊和尿膜的柄狀伸長部而形成的。臍帶中通過尿膜的血管即臍動脈和臍靜脈,，卵黃囊的血管即臍腸系膜動脈及臍腸系膜靜脈,。當(dāng)卵黃囊及其血管退化，臍動脈和臍靜脈就發(fā)達(dá)起來,，在這些間隙中可以看到疏松的膠狀的間充質(zhì),。在子宮中，子宮動脈在胎盤的母體部分出的毛細(xì)血管,，與胎盤的子體部胎兒毛細(xì)血管靠近,，在此處母體和胎兒的血液間進(jìn)行CO2和O2，代謝產(chǎn)物即代謝廢物和營養(yǎng)物質(zhì)的交換,。臍動脈將胎兒來的廢物運(yùn)送至胎盤,，臍靜脈將O2和營養(yǎng)物質(zhì)從胎盤運(yùn)送給胎兒。最后由子宮靜脈將來自胎兒的代謝廢物運(yùn)走,，某種激素和抗體等也通過臍帶從母體移交給胎兒,。臍帶中含有大量的干細(xì)胞，干細(xì)胞是生命的種子,，它會分化成機(jī)體的各種細(xì)胞,，結(jié)出各種不同的果實(shí)——血液細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞,、骨骼細(xì)胞等,。干細(xì)胞是具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞群體,；這些細(xì)胞可以通過分裂維持自身細(xì)胞的特性和數(shù)量,，又可進(jìn)一步分化為各種組織細(xì)胞，從而在組織修復(fù)等方面發(fā)揮積極作用,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSC）是一種具有高度自我更新和多向分化潛能的干細(xì)胞,。在不同的誘導(dǎo)條件下，可分化為多種造血細(xì)胞以外的組織細(xì)胞,，并具有造血支持,、免疫調(diào)節(jié)、組織修復(fù)等作用；目前,，多用于風(fēng)濕免疫疾病的治療,。間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs）是一種具有自我更新和多向分化潛能的成體干細(xì)胞，存在于骨髓,、脂肪組織,、臍血及多種胎兒組織。它可分泌多種細(xì)胞因子及生長因子,，促進(jìn)造血干細(xì)胞（HSC）的增殖與分化,。MSCs還具有免疫調(diào)節(jié)、抗炎和組織修復(fù)作用,，可減輕移植物抗宿主?。?span>GVHD）及其他移植相關(guān)并發(fā)癥。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細(xì)胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,；
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn),；
4,、長期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,，以利細(xì)胞生長；
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干采用組織貼塊法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠臍帶間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),，可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí),，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,，如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鴨白介素1(IL-1)試劑盒 96T/48T
鴨γ干擾素(IFN-γ)試劑盒 96T/48T
鴨α干擾素(IFN-α)試劑盒 96T/48T
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)試劑盒 96T/48T
小鼠轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai mated ciullinated vimein aibody (MCV) ELISA Kit 人抗突變型瓜波形蛋白抗體(MCV)試劑盒
Human1,5-anhydroglucitol,1,5-AGELISAKit 人1,5-脫水葡萄糖醇/1,5-脫水山梨(1,5-AG)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACA-IgM(Humanai-cardiolipinaibodyIgM)ELISAKit人抗心0脂抗體IgM
藥品糖精(saccharin)含量紫外光譜法定量試劑盒20次
Mouseoxidizidedglathione,GSGSELISAKit小鼠氧化型(GSGS)試劑盒規(guī)格：96T/48T
LYPD2蛋白抗體
FAM91A1蛋白抗體
GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein
CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
CG6856-PA peptide CG6856-PA抗原 0.5mgCG6856-PA peptide CG6856-PA抗原
CAT Protein Human 重組人 CAT / Catalase 蛋白
GHR重組小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / GHBP 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
IL13RA1 Protein Mouse 重組小鼠 IL-13Ra1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)
AKR1A1重組人 AKR1A1 蛋白 Protein
小鼠臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞大鼠鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)試劑盒 ,，英文名： CAMK 2 ELISA Kit
Pulmonary surfacta associated protein A (SP-A) ELISA Kit 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMCAbELISAKit大鼠黑色素細(xì)胞抗體
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶2(ACE2)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitAβ1-40馬β淀粉樣蛋白1-40
化工儀器網(wǎng)