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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用，不直接用于食品、藥品,、臨床或動物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：小鼠胚胎干細(xì)胞
組織來源：囊胚
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含LIF、BMP,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次；
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 短梭形,、多角形
傳代特性 可傳5-8代左右
消化液 0.025%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡介：
小鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織,；胚胎干細(xì)胞（Embryonic stem cell，ESCs,，簡稱ES,、EK或ESC細(xì)胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細(xì)胞，它具有體外培養(yǎng)無限增殖,、自我更新和多向分化的特性,。無論在體外還是體內(nèi)環(huán)境，ES細(xì)胞都能被誘導(dǎo)分化為機(jī)體幾乎所有的細(xì)胞類型,。進(jìn)一步說,，胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）是一種高度未分化細(xì)胞。它具有發(fā)育的全能性,，能分化出成體動物的所有組織和器官,，包括生殖細(xì)胞。ES細(xì)胞具有與早期胚胎細(xì)胞相似的形態(tài)結(jié)構(gòu),，細(xì)胞核大,，有一個(gè)或幾個(gè)核仁，胞核中多為常染色質(zhì),，胞質(zhì)胞漿少,，結(jié)構(gòu)簡單。體外培養(yǎng)時(shí),，細(xì)胞排列緊密,，呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色,，ES細(xì)胞呈棕紅色,，而周圍的成纖維細(xì)胞呈淡黃色。細(xì)胞克隆和周圍存在明顯界限,，形成的克隆細(xì)胞彼此界限不清,，細(xì)胞表面有折光較強(qiáng)的脂狀小滴,。細(xì)胞克隆形態(tài)多樣，多數(shù)呈島狀或巢狀,。小鼠ES細(xì)胞的直徑7 微米～18 微米,，豬、牛,、羊ES細(xì)胞的顏色較深,，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細(xì)胞與普通細(xì)胞有顯著差別,，有其特定的生長特性和特定的標(biāo)志,，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA）,，人類胚胎干細(xì)胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60,、TRA-1-81等標(biāo)志，這些特性和標(biāo)志均可以用于對胚胎干細(xì)胞進(jìn)行鑒定,，除此之外,，胚胎干細(xì)胞還可以在體外傳代，并保持正常核型,。在體外培養(yǎng)體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層（MEF）上培養(yǎng)時(shí),，胚胎干細(xì)胞都能呈克隆性增殖，長期保持核型正常和穩(wěn)定,，凍存解凍也不影響不分化的特性,。另外，胚胎干細(xì)胞還表現(xiàn)岀高水平端粒酶活性,，目前證明端粒酶與細(xì)胞衰老密切相關(guān),，多數(shù)成熟細(xì)胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細(xì)胞與成熟細(xì)胞不同的重要特點(diǎn),，也可能是其復(fù)制生命期限遠(yuǎn)比體細(xì)胞長的原因,。
方法簡介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶,、使用特制專用培養(yǎng)基篩選培養(yǎng),，消化傳代純化制備而來，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎干經(jīng)Oct-4免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠胰島細(xì)胞抗體試劑盒 小鼠胰島細(xì)胞抗體試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠胰島細(xì)胞抗體試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠胰島細(xì)胞抗體試劑盒,、小鼠胰島細(xì)胞抗體試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒 小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒,、小鼠血小板膜糖蛋白試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
小鼠血管生成素試劑盒 小鼠血管生成素試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠血管生成素試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T,，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠血管生成素試劑盒、小鼠血管生成素試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月,。
小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒 規(guī)格型號：96T/48T 小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒,，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝）,，產(chǎn)品別名：小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒,、小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子試劑盒 保存條件：2-8℃ 保質(zhì)期：6個(gè)月。
小鼠血管舒緩激肽(BK)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human leukocyte aigen G (HLA-G) ELISA Kit 人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)試劑盒
Humaniduronatesulfatase,IDSELISAKit 人艾杜糖硫酸酯酶(IDS)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
抗抗體IgG(間接法二步法)
優(yōu)球蛋白溶解時(shí)間(ELT)試劑盒20次
MouseIerleukin1receptoraagonist,IL-1raELISAKit小鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒規(guī)格：96T/48T
INT11蛋白抗體
E3泛素連接酶MUL1抗體
S100A1重組人 S100A1 蛋白 Protein
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)重組蛋白 Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
CD3E Protein Human 重組人 CD3e / CD3 epsilon 蛋白
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
血小板反應(yīng)蛋白(THBS1)重組蛋白 Recombinant Thrombospondin 1 (THBS1)
CD3E Protein Human 重組人 CD3e / CD3 epsilon 蛋白
S100A1重組人 S100A1 蛋白 Protein
GLYCOPROTEIN Protein Sudan ebolavirus 重組蘇丹埃博拉病毒 Glycoprotein / GP 蛋白
HA重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein
小鼠胚胎干細(xì)胞大鼠鈣調(diào)0酸酶(CaN)試劑盒 ,，英文名： CaN ELISA Kit
Porcine cholecystokinin / cholecystokinin (CCK) ELISA Kit 豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物NPTⅡ基因核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMCP-2/CCL8ELISAKit大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白2
體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitP27貓p27核心抗原
收到細(xì)胞如何處理,？
1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%,，可正常傳代,；若未超過80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi)，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),，若細(xì)胞密度超過80%，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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