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小鼠胚胎肝母細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 12:42:17瀏覽次數(shù):209

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7651 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠胚胎肝母細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MOGAT3蛋白抗體 鋅指蛋白471抗體 乙酰化TRIM29蛋白抗體 小鼠臍靜脈平滑肌細(xì)胞 大鼠前列腺成纖維細(xì)胞 PC12未分化大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞 未分化 HUVEC+GFP人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞永生化+GFP

詳細(xì)介紹

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

胚胎,;肝臟

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

上皮細(xì)胞樣

YS-01X7651

細(xì)胞簡介:

小鼠胚胎肝母分離自胚胎肝組織,;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,并在身體里面起著去氧化,、儲存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,,胃的上方,。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,,又是新陳代謝的重要器官。肝臟起源于腹側(cè)前腸內(nèi)胚層細(xì)胞(一種多潛能干細(xì)胞),。在 ED8.5 的小鼠和 ED9.5 的大鼠,,前腸的原始上皮細(xì)胞接觸心肌中胚層后快速增殖,形成肝原基,。大約1d后,,原始上皮細(xì)胞侵入原始橫膈,繼續(xù)分化為幼稚肝臟上皮細(xì)胞,,這些細(xì)胞先表達(dá) AFP 然后是ALb,。幼稚肝臟上皮細(xì)胞很快成熟,并進(jìn)一步分化為肝細(xì)胞或膽管上皮細(xì)胞,,因?yàn)榇似诘母闻K上皮細(xì)胞其具有向這兩種肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞雙向分化的潛能,,所以又稱肝母細(xì)胞。

方法簡介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母采用膠原酶消化法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胚胎肝母經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

小鼠胚胎肝母細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

  ② 消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠胚胎肝母細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

血管活性腸肽 (VIP)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

內(nèi)脂素 / 內(nèi)臟脂肪素 (Visfatin)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

軟骨糖蛋白 39(YKL-40)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(mouse ACE)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進(jìn)口分裝

小鼠乙型肝表面抗體(HBsAb)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human soluble cluster of differeiation 28 (sCD28) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原28(sCD28)試劑盒

Humanglamicaciddecarboxylase,GADELISAKit 人谷脫羧酶(GAD)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor6-keto-PGF1a(Rabbit6-keto-prostaglandinF1a)ELISAKit6同前列腺素F1a

飲料L-蘋果酸比色法定量試劑盒20

Mousemajorhistocompatibilitycomplex,MHC/H-2ELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHC/H-2)試劑盒規(guī)格:96T/48T

HRAS樣抑制因子3抗體

DPY19L2蛋白抗體

BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)

CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白

防御素β131(DEFβ131)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 131 (DEFb131)

CCL8 Protein Human 重組人 CCL8 / MCP-2 蛋白 (SUMO 標(biāo)簽)

BTLA重組小鼠 BTLA 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD3D Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3d / CD3 delta 蛋白

CD33重組人 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

小鼠胚胎肝母細(xì)胞大鼠鈣調(diào)蛋白依賴性蛋白激酶激酶(CaMKK)試劑盒 ,,英文名: CaMKK ELISA Kit

Porcine low molecular weight heparin (LMWH) ELISA Kit 豬低分子肝素(LMWH)試劑盒

轉(zhuǎn)基因植物Bar基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMCP-1/CCL2/MCAF(Humanmonocytechemotacticprotein1/monocytechemotacticandactivatingfactor)ELISAkit人單核細(xì)胞趨化蛋白1

體液血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACE)總活性熒光定量試劑盒20

ELISAKitWGA麥胚凝集素/凝集蛋白

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;

  4、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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