小鼠膀胱成纖維細胞

商品屬性：

細胞簡介：

小鼠膀胱成纖維分離自膀胱組織,；膀胱是一個儲尿器官,，在哺乳類動物，它是由平滑肌組成的一個囊形結構,，位于骨盆內,，其后端開口與尿道相通。膀胱與尿道的交界處有括約肌,，可以控制尿液的排出,。膀胱壁由三層組織組成，由內向外為黏膜層,、肌層和外膜,。肌層由平滑肌纖維構成，稱為逼尿肌,，逼尿肌收縮,，可使膀胱內壓升高，壓迫尿液由尿道排出,。在膀胱與尿道交界處有較厚的環(huán)形肌,，形成尿道內括約肌。在括約肌收縮能關閉尿道內口,，防止尿液自膀胱漏出,。膀胱壁分為三層：即漿膜層（蜂窩脂肪組織）、肌肉層（逼尿肌,、膀胱三角區(qū)?。┖宛つ樱O薄的一層移行上皮組織）。成纖維細胞（Fibroblast）是疏松結締組織的主要細胞成分,，由胚胎時期的間充質細胞分化而來,。成纖維細胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,，其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,，細胞質嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質合成和分泌活動，在一定條件下,，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉化,；成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用,。剛分離的膀胱成纖維細胞呈圓形,、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細胞貼壁,，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起,；6h后細胞基本貼壁，伸展成梭形,，胞核清晰,，分布較均勻，散在生長,，不聚集成團,；細胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài),，細胞排列緊密,，有的交叉重疊生長，平坦,、胞體較大,，細胞質透明，細胞核較大,，呈橢圓形,，顏色淡。細胞融合,，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。膀胱成纖維細胞分泌的生長因子是一種具有多功能的促有絲分裂原,，研究已表明其參與惡性腫瘤的形成過程,。近年來,，堿性成纖維細胞生長因子在膀胱癌發(fā)病過程中的作用、與生物學行為之間的關系以及治療上的應用已受到重視,。

原代細胞的培養(yǎng)條件：

　　一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；

　　2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；

　　4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；

　　6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>

　　7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；

　　8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二,、懸浮細胞培養(yǎng)

　　1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；

　　2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；

　　3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,，進行分瓶試驗；

　　4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；

　　5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠膀胱成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠膀胱成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%

細胞傳代及凍存：

原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。

　　② 消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠血小板衍生生長因子可溶性受體α(PDGFsR-α)ELISAKit   ELISA. 

小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)ELISAKit   ELISA. 

小鼠P選擇素(P-Selectin/CD62P)ELISAKit   ELISA.

豬腸三葉因子(ITF)ELISA 試劑盒

Human Legionella aibody IgA (LP Ab-IgA) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgA(LP Ab-IgA)試劑盒

Porcinecholecystokinin,CCKELISAKit 豬膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforALPELISAKit大鼠堿性0酸酶

血液卵0脂乙酰轉移酶(LCAT)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseα1-Acidglycoprotein,α1-AGPELISAKit小鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)試劑盒

G蛋白偶聯(lián)受體110抗體

CP2相關轉錄抑制因子1抗體

PDGFC重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白  Protein

肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白 Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)

SLITRK6重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標簽) Protein

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TEK Protein Rat 重組大鼠 Tie2 / TEK 蛋白

RAS癌基因家族成員RAB37(RAB37)重組蛋白 Recombinant RAB37, Member RAS Oncogene Family (RAB37)

ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)

ST6GAL1重組小鼠 ST6GAL1 / CD75 蛋白 (His 標簽) Protein

PDGFB Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PDGFB / PDGF-BB 蛋白

CRELD1重組人 CRELD1 蛋白 (His 標簽) Protein

小鼠膀胱成纖維細胞大鼠鈣粘蛋白EGF大鼠LAG七經(jīng)G-型受體2(CELSR2)試劑盒 ,，英文名： CELSR2 ELISA Kit

Rat alpha glucosidase (alpha -glucosidase) ELISA Kit 大鼠α葡萄糖苷酶(α-glucosidase)試劑盒

RatErythropoietieceptor,EPORELISAKit 大鼠紅細胞生成素受體(EPOR)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforEELISAKit大鼠雌激素

細胞培養(yǎng)懸液氧化應激活性氧(ROS)光澤精化學發(fā)光法定量試劑盒50次

Rathydroxyproline,HypELISAKit大鼠羥脯(Hyp)試劑盒