化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7336 |
細胞簡介：
小鼠腦動脈血管平滑肌分離自腦動脈組織,；腦動脈有成對的頸內(nèi)動脈和椎動脈互相銜接成動脈循環(huán),；靜脈系多不與同名動脈拌行，所收集的靜脈血優(yōu)良入靜脈竇再匯入頸內(nèi)靜脈,；各級靜脈都沒有瓣膜,。它包括腦的動脈系統(tǒng)和腦的靜脈系統(tǒng)。腦動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展,，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形，核卵圓形,、居中,；2周后細胞匯合，多數(shù)細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富,，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏,；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠腦動脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠腦動脈血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
中文名稱 方法 規(guī)格
小鼠多巴胺(DA)ELISAKit ELISA.
小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)ELISAKit ELISA.
小鼠高敏甲狀腺素(u-T4)ELISAKit ELISA.
豬補體片段3b受體(C3bR)ELISA 試劑盒
Human Legionella aibody IgM (LP Ab-IgM) ELISA Kit 人軍團菌抗體IgM(LP Ab-IgM )試劑盒
PorcineGlucoseanspoer2,GL2ELISAKit 豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GL2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforALK(Humananapasticlymphomakinase)ELISAKit人間變性淋巴瘤激酶
血液卵0脂乙酰轉(zhuǎn)移酶(LCAT)活性熒光定量試劑盒20次
MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKit小鼠血管性血友病因子/瑞斯托輔因子(vWF)試劑盒
FITC標記人CD123單克隆抗體
ATP酶H+轉(zhuǎn)運溶酶體輔助蛋白2抗體
IL13重組小鼠 IL13 / ALRH 蛋白 Protein
二氫轉(zhuǎn)乙酰基酶(DLAT)重組蛋白 Recombinant Dihydrolipoyl Transacetylase (DLAT)
NRN1L重組人 NRN1L / neuritin 1-like / Cpg15-2 蛋白 Protein
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)
CD38 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 SCARB3 蛋白
肌肌酸激酶(CKM)天然蛋白 Native Creatine Kinase, Muscle (CKM)
ALDH1A3 Protein Human 重組人 ALDH1A3 / RALDH3 蛋白 (His 標簽)
PDGFC重組小鼠 PDGF-C / SCDGF 蛋白 Protein
TEK Protein Rat 重組大鼠 Tie2 / TEK 蛋白
SLITRK6重組人 SLITRK6 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠腦動脈血管平滑肌細胞大鼠肝配蛋白B受體3(EPHB3)試劑盒 ,，英文名： EPHB3 ELISA Kit
Rat alpha L fucosidase (AFU) ELISA Kit 大鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)試劑盒
RatClusterofdiffereiation30,CD30ELISAKit 大鼠白細胞分化抗原30(CD30)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforE2ELISAKIT魚雌二醇
細胞培養(yǎng)污染性支原體M.hominis鑒定16SrDNAPCR擴增試劑盒20次
Ratinducibleniicoxidesyhase,iNOSELISAKit大鼠誘導(dǎo)型合成酶(iNOS)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行
化工儀器網(wǎng)