化工儀器網(wǎng)
詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脈絡膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細胞樣 | YS-01X7397 |
細胞簡介：
小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮分離自眼球脈絡膜組織,；脈絡膜在視網(wǎng)膜和鞏膜之間,，含有豐富血管和色素細胞,，對外力沖擊的耐受性較視網(wǎng)膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時,，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用,，使脈絡膜在內(nèi)外兩種作用夾攻下而發(fā)生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色,，圍繞視神經(jīng)乳頭部有照膜,，為青綠色帶金屬光澤的三角形區(qū)。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜,，由纖維組織,、小血管和毛細血管組成，軟而薄,，棕紅色,，在鞏膜和視網(wǎng)膜之間，續(xù)連于睫狀體后方,。脈絡膜的血循環(huán)營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層,，其含有的豐富色素起遮光暗房作用,。主要功能是營養(yǎng)視網(wǎng)膜外層及玻璃體，并有遮光作用,，使反射的物象清楚,。同時對視覺系統(tǒng)起保護作用，對整個視覺神經(jīng)有調節(jié)作用,。續(xù)連于睫狀體后方,，含豐富的血管和色素細胞，有營養(yǎng)和遮光作用,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮采用膠原酶-混合消化法并通過內(nèi)皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內(nèi)皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后,，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化,，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中,，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 96T/48T
小鼠乙酰(ACH)試劑盒 96T/48T
小鼠胰高血糖素樣肽1(GLP-1)試劑盒 96T/48T
小鼠胰高血糖素（GC）試劑盒 96T/48T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human leukocyte aigen B27 (HLA-B27) ELISA Kit 人類白細胞抗原B27(HLA-B27)試劑盒
Humanβ-glucuronidase,βGDELISAKit 人β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor破傷風抗體(雙抗原夾心法)
營養(yǎng)補充劑L-天酶偶聯(lián)反應比色法定量試劑盒20次
Mouseierleukin10,IL-10ELISAKit小鼠白介素10(IL-10)試劑盒規(guī)格：96T/48T
FAM161B蛋白抗體
aFGF胞內(nèi)結合蛋白抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198 1mgphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1抗原
GBA3重組人 GBA3 / CBGL1 蛋白 Protein
CD3E & CD3G Protein Human 重組人 CD3E & CD3G Heterodimer 蛋白
COMP Protein Human 重組人 COMP 蛋白
phospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198 1mgphospho-AMPK alpha-1/PRKAA1(Thr198) peptide 0酸化腺苷單0酸活化蛋白激酶α1抗原
CD3E & CD3G Protein Human 重組人 CD3E & CD3G Heterodimer 蛋白
HA重組甲型流感 H3N2 (A/reassortant/IVR-155) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
COMP Protein Human 重組人 COMP 蛋白
GBA3重組人 GBA3 / CBGL1 蛋白 Protein
小鼠脈絡膜血管內(nèi)皮細胞大鼠肝素結合EGF樣生長因子(HBEGF)試劑盒 ，英文名： HBEGF ELISA Kit
Porcine compleme 3 (C3) ELISA Kit 豬補體蛋白3(C3)試劑盒
難辨梭狀芽胞桿菌(Cd)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMCV(Humanai-myelinaibodyIgA)ELISAKit人抗突變型瓜波形蛋白抗體
體液人體鼻病毒(rhinovirus)定性試劑盒20次
ELISAKitIL-2R牛白介素2受體
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性,；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L,；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行
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