詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7198 |
細胞簡介:
小鼠卵巢顆粒分離自卵巢組織,;卵巢是雌性動物的生殖器官,,卵巢的功能是產生卵以及類固醇激素,。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),,呈葡萄狀,,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,,卵巢表面密布血管,。卵巢的大小與年齡和產卵期有關,。大多數脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,,而所有鳥類只有左側卵巢有機能,。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,,其下方有薄層的結締組織,。卵巢的內部結構可分為皮質和髓質。皮質位于卵巢的周圍部分,,主要由卵泡和結締組織構成,;髓質位于中央,由疏松結締組織構成,,其中有許多血管、淋巴管和神經,。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育,、排卵,、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內的最大細胞群,,也是主要的功能細胞,,卵泡發(fā)育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖,而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起,,尤其在卵泡發(fā)育后期,,此外,顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成,,維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環(huán)境,。細胞形狀呈圓形或橢圓形。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠卵巢顆粒采用先機械分離,,而后膠原酶消化,,最后差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠卵巢顆粒經FSHR免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數板計數,。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品:
性激素結合球蛋白 英文名稱: Sex Hormone Binding Globulin 規(guī)格: 英文縮寫: SHBG
血小板衍生生長因子 英文名稱: Platelet Derived Growth Factor 規(guī)格: 英文縮寫: PDGF
胰島素原 英文名稱: Proinsulin 規(guī)格: 英文縮寫: PINS
催乳素 英文名稱: Prolactin 規(guī)格: 英文縮寫: PRL
小鼠乙酰(ACH)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble factor related apoptosis ligand (sFASL) ELISA Kit 人可溶性凋亡相關因子配體(sFASL)試劑盒
HumanGlomerulaissueexact-advancedglycosylationendproducts,GTE-AGEELISAKit 人腎小球組織糖基化終末產物(GTE-AGE)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor5-HT(Human5-Hydroxyyptamine)ELISAKit人5羥色胺
飲料氨熒光定量試劑盒20次
MouseMacrophageColony-StimulatingFactor,M-CSFELISAKit小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DjC8蛋白抗體
7號染色體開放閱讀框68抗體
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)
KIAA1279重組人 KIAA1279 蛋白 Protein
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白
NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)重組蛋白 Recombinant Nicotinamide Adenine Dinucleotide Phosphate Oxidase 1 (NOX1)
CCNE1 Protein Human 重組人 CCNE1 / Cyclin-E1 蛋白
ERBB2重組人 HER2 / ErbB2 蛋白 (Fc 標簽) Protein
NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Anhui/1/2013) 神經酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)
KIAA1279重組人 KIAA1279 蛋白 Protein
小鼠卵巢顆粒細胞大鼠干擾素誘導蛋白11(IP-11/CXCL11)試劑盒 ,英文名: IP-11/CXCL11 ELISA Kit
Porcine ierleukin 3 (IL-3) ELISA Kit 豬白介素3(IL-3)試劑盒
超級細菌NDM-1基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMEC/CCL28(Humanmucosaeassociatedepitheliachemokine)ELISAKit人粘膜相關上皮趨化因子
體液葡萄糖氧化酶比色法定量試劑盒20次
ELISAKitsIgA牛分泌型免疫球蛋白A
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行