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小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 11:52:03瀏覽次數(shù):210

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7667 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:鈉/磷酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體 紅細(xì)胞糖苷α1抗體 原肌球蛋白4抗體 小鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞 大鼠食管上皮細(xì)胞 BICR 22人頭頸部鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞 SK-HEP-1人肝腹水腺癌細(xì)胞

詳細(xì)介紹

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

口腔黏膜組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7667

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠口腔粘膜成纖維分離自口腔粘膜組織;口腔(oral cavity)是消化道的起始部分,。前借口裂與外界相通,,后經(jīng)咽峽與咽相續(xù)??谇粌?nèi)有牙,、舌等器官??谇坏那氨跒榇?、側(cè)壁為頰、頂為腭,、口腔底為黏膜和肌等結(jié)構(gòu),。口腔借上,、下牙弓分為前外側(cè)部的口腔前庭(oral vestibule)和后內(nèi)側(cè)部的固有口腔(oral cavity proper),;當(dāng)上、下頜牙咬合時(shí),,口腔前庭與固有口腔之間可借第三磨牙后方的間隙相通,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,。成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的表皮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,胞核清晰,,分布較均勻,,散在生長,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔粘膜成纖維采用-膠原酶混合酶消化后差速貼壁制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠口腔粘膜成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

心血管活性多肽13   英文名稱:   Apelin 13   英文縮寫:   AP13   規(guī)格:  

活化蛋白C   英文名稱:   Activated protein C   英文縮寫:   APC   規(guī)格:  

增殖誘導(dǎo)配體   英文名稱:   a proliferation-inducing ligand   英文縮寫:   APRIL   規(guī)格:  

水通道蛋白-4   英文名稱:   Aquaporin-4   英文縮寫:   AQP-4   規(guī)格:

小鼠胰島素自身抗體(IAA)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat monocyte chemotactic protein 1 (MCP-1/CCL2/MCAF) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1(MCP-1/CCL2/MCAF)試劑盒

HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit 人多形核白細(xì)胞彈性蛋白酶(PMNElastase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor28SrRNP(Human28SribosomeRNPaibody)ELISAKit28S抗核糖體抗體

飲料氟元素比色法定量試劑盒20

Mouseleoopichormone,LHELISAKit小鼠促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格:96T/48T

CD73抗體

2號(hào)染色體開放閱讀框69抗體

FGFR1重組小鼠 FGFR1 / CD331 蛋白 Protein

Apaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1 0.5mgApaf-1 (Apoptosis protease activating factor-1)(NT) 凋亡蛋白活性因子-1(抗原)

ADM重組人 ADM / Adrenomedullin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

CD5 Protein Rat 重組大鼠 CD5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

白介素3(IL3)重組蛋白 Recombinant Interleukin 3 (IL3)

CD164 Protein Human 重組人 CD164 / Endolyn 蛋白

OSM重組小鼠 Oncostatin M / OSM 蛋白 Protein

CLEC5A Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CLEC5A / MDL1 / MDL-1 蛋白

SRI重組人 SRI / Sorcin 蛋白 Protein

小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞大鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒 ,英文名: U-TSH ELISA Kit

Porcine ierleukin 1 receptor aagonist (IL1Ra) ELISA Kit 豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒

札如病毒(SV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHBELISAKit小鼠高鐵血紅蛋白

體液牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定性試劑盒20

牛淋巴細(xì)胞因子ELISAKit牛淋巴細(xì)胞因子ELISAKit,,牛淋巴細(xì)胞因子ELISAKit,,

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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