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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
口腔黏膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7675 |
細胞簡介：
小鼠口腔上皮分離自口腔黏膜組織,；口腔上皮細胞是一種上皮細胞，呈扁平,、多邊形，形狀不規(guī)則,?？谇桓鞅诙加叙つじ采w，口腔上皮細胞主要分布在口腔兩側(cè)頰部,。上皮的垂直切面上,，細胞形狀不一,。緊靠基膜的一層基底細胞為矮柱狀，為具有增殖分化能力的干細胞,，部分子細胞向淺層移動,。基底層以上是數(shù)層多邊形細胞,，再上為幾層梭形或扁平細胞,。僅靠近表面幾層細胞為扁平狀，基底層細胞能不斷分裂增生,，以補充表層衰老或損傷脫落的細胞,。復(fù)層扁平上皮深層的結(jié)締組織內(nèi)有豐富的毛細血管，有利于復(fù)層扁平上皮的營養(yǎng),。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應(yīng)將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗,；
4、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠口腔上皮細胞先消化,、后-膠原酶混合消化法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠口腔上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬血小板衍生生長因子(PDGF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血小板活化因子(PAF)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血纖蛋白原降解產(chǎn)物(FDP)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬血管內(nèi)皮鈣粘著蛋白復(fù)合體(VE-cad)ELISA 試劑盒
Human maix Gla protein (MGP) ELISA Kit 人基質(zhì)γ羧基谷蛋白(MGP)試劑盒
RabbitsolubleFactor-relatedApoptosis,sFAS/Apo-1ELISAKit 兔可溶性凋亡相關(guān)因子(sFAS/Apo-1)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-HDV(Humanai-hepatitisDvirusaibody)ELISAKit人抗丁型肝病毒抗體
血液D-葡萄糖氧化法定量試劑盒20次
PorcineHyaluronicacid,HAELISAKit豬透明質(zhì)酸(HA)試劑盒
CD32B重組兔單克隆抗體
21號染色體開放閱讀框63抗體
SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標簽)
SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標簽)
胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP1)重組蛋白 Recombinant Insulin Like Growth Factor Binding Protein 1 (IGFBP1)
BIRC2 Protein Human 重組人 cIAP1 / HIAP2 蛋白 (AVI 標簽)
SCARB2重組人 LIMP-2 / SCARB2 / CD36L2 蛋白 (His & Fc 標簽) Protein
SSPA Protein E. coli 重組大腸桿菌 ssPA / Stringent starvation protein A 蛋白 (His 標簽)
HA重組甲型流感 H1N1 (A/New Caledonia/20/1999) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠口腔上皮細胞大鼠高密度脂蛋白(HDL)試劑盒 ,，英文名： HDL ELISA Kit
Rabbit leoopic hormone (LH) ELISA Kit 兔子促黃體激素(LH)試劑盒
腸道腺病毒(EADV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMHB(HumanMethemoglobin)ELISAKit人高鐵血紅蛋白
體液牛病毒性腹瀉病毒(BovineViralDiarrhoeaVirus;BVDV)定量PCR擴增試劑盒20次
ELISAKitPFK牛0酸果糖激酶
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