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小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

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更新時間:2024-11-04 11:45:14瀏覽次數(shù):180

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號 YS-01X7477 主要用途 僅供科研研究實驗
小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:甲基化樣蛋白8抗體 鋅指蛋白206抗體 DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶3-β1抗體 小鼠口腔粘膜成纖維細(xì)胞 大鼠胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞 CAL 51人乳腺癌細(xì)胞 PC-3人前列腺癌

詳細(xì)介紹

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號

眼角膜組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7477

細(xì)胞簡介:

小鼠角膜基質(zhì)分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,,約占纖維膜的前1/6,,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形,。角膜厚度各部分不盡相同,,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,,如有外物接觸角膜,,眼瞼便會不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,,角膜并沒有血管,,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣,。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層,、前彈力層,、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層,。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,,占據(jù)角膜厚度的90%,由角膜基質(zhì)細(xì)胞,、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成,。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,,透明度高的特點,,正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,維持角膜的透明度,,此細(xì)胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義,。角膜基質(zhì)細(xì)胞,存在于角膜基質(zhì)層中,,在正常情況下,,處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時,,不同上皮來源的因子及環(huán)境信號,,將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),決定著角膜能否被修復(fù),。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;

  2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L,;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4,、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗,;

  4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;

  5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。

方法簡介:

公司實驗室分離的小鼠角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。

質(zhì)量檢測:

公司實驗室分離的小鼠角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBVHCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%CO2,,5%

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

乙酸銨 (醋酸銨)   100g

AmmoniumAcetate   500g

化銨   100g

AmmoniumChloride   500g

鴨子胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA 試劑盒

Human ai brain tissue aibody (ABAb) ELISA Kit 人抗腦組織抗體(ABAb)試劑盒

Humanmajorhistocompatibilitycomplex,MHC/HLA-ELISAKit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHC/HLA-)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAD(Humanamiodarone)ELISAKit人呋同

血液總?cè)樗岜壬ǘ吭噭┖?span>20

Mouseprostatespecificaigen,PSAELISAKit小鼠前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒

APC標(biāo)記人CD103 (ITGAE)單克隆抗體

組蛋白賴N-甲基轉(zhuǎn)移酶2C抗體

TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)重組蛋白 Recombinant Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4)

GFER重組人 GFER / ALR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

CADM3 Protein Human 重組人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

鋅指同源框蛋白4(ZFHX4)重組蛋白 Recombinant Zinc Finger Homeobox Protein 4 (ZFHX4)

CADM3 Protein Human 重組人 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF4重組人 TNFRSF4 / OX40 / CD134 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H1N1 重組甲型流感 H1N1 (A/California/04/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)

GFER重組人 GFER / ALR 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠角膜基質(zhì)細(xì)胞大鼠高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒 ,,英文名: MHB ELISA Kit

Rabbit Compleme 4 (C4) ELISA Kit 兔子補體蛋白4(C4)試劑盒

痢疾桿菌(SH)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMHCIII/AgBIII/H-1IIIELISAKit大鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類

體液內(nèi)毒素凝膠法定量試劑盒20

ELISAKitGHRP牛生長激素釋放多肽


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