詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脊髓組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7540 |
細胞簡介:
小鼠脊髓神經(jīng)元分離自脊髓組織,;脊髓是細細的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),,位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護;是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分,。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息,。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,,在椎管里面,,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),,分布到四肢,、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),,主要由神經(jīng)細胞構(gòu)成,;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成,;脊髓是許多簡單反射的中樞,。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官,。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,,也是許多簡單反射活動的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),,31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的,。神經(jīng)系統(tǒng)最基本的結(jié)構(gòu)和功能單位是神經(jīng)元,即神經(jīng)細胞,,其大小和外觀在中樞神經(jīng)系統(tǒng)中差異很大,。但都具有胞體和樹突、軸突,。胞體又叫核周體,,內(nèi)含神經(jīng)絲,、微管、內(nèi)質(zhì)網(wǎng),、游離核糖體和一個有明顯核仁的核,。一些大神經(jīng)元突起的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)可用Nissl染色顯示,在光鏡下是灰藍色斑塊狀,,稱為尼氏小體,。樹突和軸突是神經(jīng)元的突起,能在神經(jīng)元之間傳遞電沖動,,突起的大小和形態(tài)各不相同,,很難用常規(guī)的顯微鏡鑒別。脊髓組織內(nèi)含有大量膠質(zhì)細胞,,神經(jīng)元含量少,,分離純化難度大,且脊髓神經(jīng)元細胞是高度分化的終末細胞,,不能分裂增殖,,培養(yǎng)要求高。剛接種的脊髓神經(jīng)元呈圓形,,體積小,,透亮,無突起,。培養(yǎng)2-3d,,可見胞體增大,突起增多延長,;培養(yǎng)6-7d,,細胞體大飽滿,突起明顯增加延長并交織成網(wǎng),,光暈明顯,,立體感強。培養(yǎng)20d后,,死亡細胞明顯增加,,細胞出現(xiàn)內(nèi)空泡,突起粗細不均,,甚至脫壁,,發(fā)生細胞崩解。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元采用膠原酶&聯(lián)合消化法,、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠脊髓神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞,;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬胰島素樣生長因子1試劑盒 豬胰島素樣生長因子1試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬胰島素樣生長因子1試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬胰島素樣生長因子1試劑盒,、豬胰島素樣生長因子1eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬胰島素試劑盒 豬胰島素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬胰島素試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬胰島素試劑盒、豬胰島素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬氧化低密度脂蛋白試劑盒 豬氧化低密度脂蛋白試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬氧化低密度脂蛋白試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬氧化低密度脂蛋白試劑盒,、豬氧化低密度脂蛋白eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬壞死因子α試劑盒 豬壞死因子α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬壞死因子α試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬壞死因子α試劑盒,、豬壞死因子αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬血管生成素2(ANG-2)ELISA 試劑盒
Human creatine kinase isoenzyme MB (CK-MB) ELISA Kit 人肌酸激酶同工酶MB(CK-MB)試劑盒
RabbitFibrinogen,FbgELISAKit 兔血纖蛋白原(Fbg)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforai-Q-Ab(Humanai-Qfeveraibody)ELISAKit人抗Q熱抗體
血液3-羥-3-甲戊二酰(HMG-COA)還原酶活性直接比色法定量試劑盒20次
PorcineInfluenzavirusesA,FLUAELISAKit豬流感病毒A(FLUA)試劑盒
AF680標(biāo)記的血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體
轉(zhuǎn)錄阻抑蛋白CTCF單克隆抗體
ADAM15重組小鼠 ADAM15 / MDC15 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
C4結(jié)合蛋白β(C4BPβ)重組蛋白 Recombinant C4 Binding Protein Beta (C4BPb)
LILRA3重組人 ILT6 / LILRA3 蛋白 Protein
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
DLL1 Protein Rat 重組大鼠 DLL1 / Delta-like 蛋白 1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TGFβ誘導(dǎo)早期應(yīng)答基因1(TIEG1)重組蛋白 Recombinant TGF Beta Inducible Early Response Gene 1 (TIEG1)
BLK Protein Human 重組人 BLK / B Lymphocyte Kinase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)
KYNU重組小鼠 KYNU / Kynureninase 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
MET Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 / 恒河猴 c-MET / HGFR 蛋白
RUVBL1重組人 RUVBL1 / RVB1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠脊髓神經(jīng)元細胞大鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒 ,英文名: OFQ/N ELISA Kit
Rabbit leukemia inhibitory factor receptor (LIFR) ELISA Kit 兔子白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒
球菌(SA)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIFELISAKit大鼠巨噬細胞移動抑制因子
體液亮(leucine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitPAF牛血小板活化因子