詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
滑膜組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7684 |
細胞簡介:
小鼠滑膜間充質(zhì)干分離自滑膜組織,;滑膜組織是位于關(guān)節(jié)腔內(nèi)面的內(nèi)襯結(jié)構(gòu),,各種關(guān)節(jié)內(nèi)疾病均會累及滑膜,。而滑膜細胞是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),同時在各種關(guān)節(jié)疾患中也是主要病變部位,。骨關(guān)節(jié)炎(OA)以關(guān)節(jié)軟骨退行性變?yōu)樘卣?,其病理改變累及關(guān)節(jié)的各個組成部分,但絕不僅局限于軟骨,,還包括軟骨下骨,、滑膜,、半月板和韌帶。各組成部分的病理改變相互影響,,相互作用,,共同加速關(guān)節(jié)的退變?;ぜ毎菢?gòu)成滑膜層的最大細胞群體,,是維持關(guān)節(jié)正常功能的重要組織結(jié)構(gòu),它包埋在顆粒狀無定性的基質(zhì)中,,基質(zhì)內(nèi)有分散的纖維分布,。滑膜由A型(巨噬樣滑膜細胞),、B型(成纖維樣滑膜細胞)以及C型(樹突細胞樣滑膜細胞)細胞組成,。滑膜細胞主要功能:①滑膜細胞產(chǎn)生潤滑液成分,,并且與關(guān)節(jié)腔的吸收和血液/潤滑液交換有關(guān),;②滑膜細胞增生,表現(xiàn)為不依賴于支持物生長,,并且分泌大量的效應(yīng)分子來促進炎癥和關(guān)節(jié)損壞,;③是自身自分泌和旁分泌網(wǎng)絡(luò)中效應(yīng)因子的一部分。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠滑膜間充質(zhì)干采用膠原酶消化法和低密度接種法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠滑膜間充質(zhì)干經(jīng)CD29、CD44免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
心肌鈣蛋白 (c) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
CXCL8(CXCL-8) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
結(jié)蛋白 (Desmin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
雌三醇 (E3) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白1(IGFBP-1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble adenylate cyclase (sAC) ELISA Kit 人可溶性腺苷酸環(huán)化酶(sAC)試劑盒
HumanFibroblastsurfaceprotein,FSPELISAKit 人纖維母細胞表面抗原(FSP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor25(OH)D3/25HVD3ELISAKit大鼠25羥基3
飲料果膠生物酶比色法定量試劑盒20次
Mouselipoprotein-associatedphospholipaseA2,Lp-PL-A2ELISAKit小鼠脂蛋白相關(guān)0脂酶A2(Lp-PL-A2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
9號染色體開放閱讀框78抗體
轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體
BDNF重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein
彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)
VIP重組人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
彈性蛋白微原纖維界面因子1(EMILIN1)重組蛋白 Recombinant Elastin Microfibril Interface Located Protein 1 (EMILIN1)
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
BDNF重組小鼠 / 人 BDNF 蛋白 Protein
CD3D & CD3E Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD3D & CD3E Heterodimer 蛋白
VIP重組人 Vasoactive intestinal peptide / VIP 蛋白 Protein
小鼠滑膜間充質(zhì)干細胞大鼠谷酸脫羧酶自身抗體IgG(GAD-Ab-IgG)試劑盒 ,,英文名: GAD-Ab-IgG ELISA Kit
Porcine ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 豬β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒
侵襲性大腸桿菌(EIEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIGF/CXCL9(Humanmonocyteierferongammainducingfactor)ELISAKit人γ干擾素誘導單核細胞因子
體液賴(lysine)含量化學比色法定量試劑盒20次
ELISAKitMHC/BoLA牛主要組織相容性復合體
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行