詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
呼吸道 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7534 |
細(xì)胞簡介:
小鼠呼吸道上皮分離自呼吸道,;呼吸道是肺呼吸時(shí)氣流所經(jīng)過的通道,,有肺脊椎動物的呼吸道分上,、下兩部:鼻、咽和喉合稱上呼吸道,。氣管及其以后一分再分的管道,,合稱為下呼吸道,或稱為氣管樹,。氣管樹是隨著動物的進(jìn)化逐漸復(fù)雜化的,。整個呼吸道內(nèi)表面都分布有分泌液和纖毛(鼻孔、咽后壁和聲帶黏膜除外),,它能溫暖(或冷卻),、濕潤和凈化吸入的空氣,對于呼吸器官和機(jī)體有著保護(hù)作用,。呼吸道以骨或軟骨做支架,,其內(nèi)表面覆蓋著黏膜,黏膜內(nèi)分布著豐富的毛細(xì)血管,。呼吸道上皮細(xì)胞屬于假復(fù)層纖毛柱狀上皮,,分布于呼吸道的內(nèi)表面,主要由柱狀,,杯形,,梭形和錐形等不同形狀細(xì)胞組成??瓷先ハ駨?fù)層上皮,,但實(shí)際上所有細(xì)胞底部均附于基膜上,屬單層上皮,,故稱假復(fù)層柱狀上皮,,上皮表面有纖毛,杯狀細(xì)胞可分泌粘液,,包裹著大量細(xì)菌,,借助纖毛不斷擺動將其慢慢移動至出消化道。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行,;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn),;
4,、長期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠呼吸道上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠組織因子途徑抑制物(TFPI)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白4(AQP-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠水通道蛋白3(AQP-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠胰島素樣生長因子2(IGF-2)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat monocyte chemotactic protein 4 (MCP-4/CCL13) ELISA Kit 大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒
HumanGasicMucin,GMELISAKit 人胃粘液素(GM)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor2,3-DPG(Human2,3-Disphosphoglycerate,2)ELISAKit人2,3-二0酸甘油酸
飲料環(huán)(cyclamate)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
Mouselipoproteinα,Lp-αELISAKit小鼠脂蛋白α(Lp-α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
6號染色體開放閱讀框81抗體
周期素依賴性激酶9重組兔單克隆抗體
IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
ABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原 0.2mgABCD-1/CCL22 嗜酸粒細(xì)胞趨化蛋白22抗原
CD19 Protein Human 重組人 CD19 / Leu-12 蛋白
IFNGR2重組小鼠 IFNGR2 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Rat 重組大鼠 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
BPIFA2重組人 BPIFA2 / C20orf70 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
小鼠呼吸道上皮細(xì)胞大鼠谷酰胺(Gln)試劑盒 ,,英文名: Gln ELISA Kit
Porcine ierferon alpha (IFN- alpha) ELISA Kit 豬α干擾素(IFN-α)試劑盒
出血性大腸桿菌(EHEC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-1Alpha/CCL3(HumanMacrophageInflammatoryProtein-1Alpha)ELISAkit人巨噬細(xì)胞性蛋白1α
體液科薩基病毒B(CoxsackievirusB)定性試劑盒20次
ELISAKit2,3-DPG犬2,3-二0酸甘油酸