詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞
組織來源:海綿體組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡介:
小鼠海綿體平滑肌分離自海綿體組織,;海綿體,,又稱海綿體肌,是最硬的平滑肌和結(jié)締組織,。海綿體是一種勃起組織,,外面包有堅厚的白膜,內(nèi)部由結(jié)締組織和平滑肌組成海綿狀支架,,其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內(nèi)皮細(xì)胞,、平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞3種細(xì)胞成分,。其中平滑肌細(xì)胞和成纖維細(xì)胞鑲嵌于海綿體細(xì)胞外基質(zhì)的膠原中,在消化海綿體組織時,,膠原酶的作用主要是松解海綿體內(nèi)皮細(xì)胞與基膜的聯(lián)系,,破壞海綿體內(nèi)皮細(xì)胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細(xì)胞,。平滑肌,,是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁,、膀胱,、子宮,、男性和女性生殖道、消化道,、呼吸道,、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細(xì)菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血紅素氧化酶 (HO-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
熱休克蛋白 27(HSP27) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
熱休克蛋白 70(HSP70) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
HA 絲酸肽酶 1 (Ha1) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai neuophil aibody (ANA) ELISA Kit 人抗中性粒細(xì)胞抗體(ANA)試劑盒
Humacellreceptor,TCRELISAKit 人T細(xì)胞受體(TCR)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforABeta1-40ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-40
乙基十六烷基二甲基溴化胺(cetyldimethylethammoniumbromide)1公斤
Mousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAKit小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCAIgG)試劑盒規(guī)格:96T/48T
2'-5'-寡腺苷酸合成酶3抗體
腫瘤高表達(dá)細(xì)胞周期相關(guān)蛋白抗體
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原
GFRA1重組人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白
FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原
CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白
NA重組甲型流感 H1N1 神經(jīng)酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
GFRA1重組人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein
小鼠海綿體平滑肌細(xì)胞大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 ,,英文名: BMP-2 ELISA Kit
Porcine procollagen peptide (P III NP) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒
埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIP-5(Humanmacrophageinflammatoryprotein5)ELISAKit人巨噬細(xì)胞性蛋白5
體液結(jié)構(gòu)型內(nèi)皮細(xì)胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitCD8犬白細(xì)胞分化抗原8
收到細(xì)胞如何處理,?
1,、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸浮),、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢,、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作