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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦海馬體 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7347 |
細胞簡介：
小鼠海馬神經(jīng)元分離自海馬體,；海馬體(Hippocampus),，又名海馬回,、海馬區(qū)、大腦海馬,，海馬體主要負責記憶和學習,。海馬神經(jīng)元細胞是海馬區(qū)的主要細胞組成，主要功能是參與近期記憶,、情緒及內(nèi)臟功能調(diào)節(jié),、是老年性癡呆、癲癇等疾病的主要病灶之一,。海馬屬于大腦的邊緣系統(tǒng),，在學習、記憶,、情緒反應及神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理生理變化等方面有重要作用,，而且海馬組織是中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)主要的神經(jīng)干細胞聚集區(qū)，具有高度序化板層結(jié)構(gòu)和神經(jīng)元相對獨立分布的特點,，境界相對清晰,，便于取材,，因此，海馬神經(jīng)元體外培養(yǎng)模型被廣大基礎醫(yī)學和臨床醫(yī)學研究者當做理想的實驗模型,。海馬神經(jīng)元細胞培養(yǎng)是研究神經(jīng)細胞生物學特性和外源干擾因素作用(細胞因子)的有效細胞模型,，其在神經(jīng)生物學，發(fā)育生物學體外實驗研究中已被廣泛應用,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性,；
2、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L,；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2,、短期培養(yǎng),，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),，進行分瓶試驗；
4,、長期培養(yǎng)時,，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長,；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元采用消化法,、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學試劑抑制法制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠海馬神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞,；屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出,，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素原(aGT)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-Ⅱ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 96T/48T
小鼠血管活性腸肽(VIP)試劑盒 96T/48T
小鼠纖溶酶/纖維蛋白溶酶(PL/Fbn)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat osteoprotegerin (OPG) ELISA Kit 大鼠骨保護素(OPG)試劑盒
Humandopamine-β-hydroxylase,DBHELISAKit 人多巴胺-β羥化酶(DBH)試劑盒 96T/48T 進口分裝
ChickenHeatShockProtein20,HSP-20試劑盒雞熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細胞CASPASE-9蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHelicobacterpyloriIgG,Hp-IgGELISAKit小鼠幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T
1號染色體開放閱讀框54抗體
智力發(fā)育調(diào)節(jié)相關(guān)蛋白BRWD3抗體
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標簽)
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
小鼠海馬神經(jīng)元細胞大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒 ,，英文名： BMP-4 ELISA Kit
Pig aminoterminal propeptide of type III procollagen (P III ) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原氨基端肽(PⅢ)試劑盒
2型脊髓灰質(zhì)病毒(PV-2)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMIS/AMH)ELISAKit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激素
體液離子(K)濃度化學比色法定量試劑盒20次
ELISAKitE犬雌激素
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