詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
關(guān)節(jié)軟骨組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 梭形,、多角形 | YS-01X7318 |
細胞簡介:
小鼠關(guān)節(jié)軟骨分離自關(guān)節(jié)軟骨組織;關(guān)節(jié)軟骨屬于透明軟骨,,表面光滑,、呈淡藍色、有光澤,,它是由一種特殊的叫做致密結(jié)締組織的膠原纖維構(gòu)成的基本框架,,這種框架呈半環(huán)形,類似拱形球門,,其底端緊緊附著在下面的骨質(zhì)上,,上端朝向關(guān)節(jié)面,這種結(jié)構(gòu)使關(guān)節(jié)軟骨緊緊與骨結(jié)合起來而不會掉下來,,同時當受到壓力時候,,還可以有少許的變形,起到緩沖壓力的作用,。在這些纖維之間,,散在分布著軟骨細胞,軟骨細胞由淺層向深層逐漸由扁平樣至橢圓或圓形的細胞組成,,這些軟骨細胞維持關(guān)節(jié)軟骨的正常代謝,。關(guān)節(jié)軟骨沒有神經(jīng)支配,也沒有血管,,其營養(yǎng)成分必須從關(guān)節(jié)液中取得,,而其代謝廢物也必須排至關(guān)節(jié)液中,關(guān)節(jié)軟骨的這種營養(yǎng)代謝必須通過關(guān)節(jié)運動,,使關(guān)節(jié)軟骨不斷的受到壓力刺激才行,,所以關(guān)節(jié)運動對于維持關(guān)節(jié)軟骨的正常結(jié)構(gòu)起重要的作用。關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),。幼稚的關(guān)節(jié)軟骨細胞位于關(guān)節(jié)軟骨組織的表層,,單個分布、體積較小,、呈橢圓形,,長軸與關(guān)節(jié)軟骨表面平行,越向深層的關(guān)節(jié)軟骨細胞體積之間增大呈圓形,,細胞核圓形或卵圓形,、染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的關(guān)節(jié)軟骨細胞多2-8個成群分布于關(guān)節(jié)軟骨陷窩內(nèi),這些關(guān)節(jié)軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,,稱為同源細胞群,。電鏡下,關(guān)節(jié)軟骨細胞有突起和皺褶,,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復合體及少量的線粒體,。在組織切片中,關(guān)節(jié)軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙,。體外培養(yǎng)的關(guān)節(jié)軟骨細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨采用膠原酶聯(lián)合消化制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠關(guān)節(jié)軟骨經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血紅素氧化酶 英文名稱: heme oxygenase-1 規(guī)格: 英文縮寫: HO-1
熱休克蛋白27 英文名稱: Heat shock protein 27 規(guī)格: 英文縮寫: HSP27
熱休克蛋白70 英文名稱: Heat shock protein 70 規(guī)格: 英文縮寫: HSP70
HA絲酸肽酶1 英文名稱: high temperature requireme A 規(guī)格: 英文縮寫: Ha 1
小鼠載脂蛋白A1(apo-A1)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai neuophil granules aibody (ANGA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞顆粒抗體(ANGA)試劑盒
Humanclusterin,CLUELISAKit 人凝聚素(CLU)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitfor8-OHdG(Mouse8-Hydroxy-desoxyguanosine)ELISAKit小鼠8羥基脫氧鳥苷
乙酸待測樣品處理試劑盒20次
Mousemyeloperoxidase,MPOELISAKit小鼠髓過氧化物酶(MPO)試劑盒規(guī)格:96T/48T
13號染色體開放閱讀框38抗體
整合素β1(CD29)重組兔單克隆抗體
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
Substance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1 0.5mgSubstance P Receptor (Neurokinin receptor1;Tachykinin receptor1) P物質(zhì)受體(抗原)
CCL2 Protein Human 重組人 CCL2 / MCP-1 / MCP1 蛋白
CALM2重組人 Calmodulin 2 / CALM2 蛋白 Protein
TIMP1 Protein Human 重組人 TIMP-1 / TIMP1 蛋白
SERPINA7重組人 SerpinA7 / TBG 蛋白 Protein
小鼠關(guān)節(jié)軟骨細胞大鼠骨成型蛋白受體Ⅱ(BMPR-Ⅱ)試劑盒 ,,英文名: BMPR-Ⅱ ELISA Kit
Porcine procollagen I carboxy terminal peptide (P I CP) ELISA Kit 豬Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒
流感嗜血桿菌(Hi)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMLC(HumanMyosinlightChain)ELISAKit人肌球蛋白輕鏈
體液脊髓過氧化酶(MPO)活性(DTNB)高質(zhì)敏感比色法定量試劑盒20次
ELISAKitHCⅡ犬肝素輔因子Ⅱ
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行