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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞
組織來(lái)源:骨髓
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 巨噬細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞,;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 (12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠骨髓來(lái)源巨噬分離自骨髓,;骨髓是機(jī)體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi),。成年動(dòng)物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細(xì)胞、血小板和各種白細(xì)胞,。血小板有止血作用,,白細(xì)胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細(xì)菌,、病毒等,;某些淋巴細(xì)胞能制造抗體。因此,,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長(zhǎng)骨(如肱骨,、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細(xì)胞的骨髓略呈紅色,,稱為紅骨髓,。出生時(shí),紅骨髓充滿全身骨髓腔,,隨著年齡增大,,脂肪細(xì)胞增多,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。巨噬細(xì)胞屬免疫細(xì)胞,有多種功能,,是研究細(xì)胞吞噬,、細(xì)胞免疫和分子免疫學(xué)的重要對(duì)象,。巨噬細(xì)胞較易獲得,便于培養(yǎng),,并可進(jìn)行純化,。巨噬細(xì)胞屬不繁殖細(xì)胞群,在條件適宜下可生活2-3周,,多用做原代培養(yǎng),,難以長(zhǎng)期生存。巨噬細(xì)胞(Macrophages)是一種位于組織內(nèi)的白血球,,源自單核細(xì)胞,,而單核細(xì)胞又來(lái)源于骨髓中的前體細(xì)胞。巨噬細(xì)胞和單核細(xì)胞皆為吞噬細(xì)胞,,在脊椎動(dòng)物體內(nèi)參與非特異性防衛(wèi)(先天性免疫)和特異性防衛(wèi)(細(xì)胞免疫),。它們的主要功能是以固定細(xì)胞或游離細(xì)胞的形式對(duì)細(xì)胞殘片及病原體進(jìn)行噬菌作用(即吞噬以及消化),并激活淋巴球或其他免疫細(xì)胞,,令其對(duì)病原體作出反應(yīng),。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來(lái)源巨噬采用分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞經(jīng)細(xì)胞因子誘導(dǎo)分化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨髓來(lái)源巨噬經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
豬鏈球菌Ⅱ型(SS-Ⅱ)核酸試劑盒 48T
豬弓形蟲(TOX)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
豬弓形蟲(TOX)核酸試劑盒 48T
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CLIAKitforANA(HumanAi-nuclearAibody)ELISAKit人抗核抗體
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Porcinebrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit豬腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒
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原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體
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Melamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺 0.5mlMelamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺
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CDCP1 Protein Mouse 重組小鼠 CDCP1 蛋白
Melamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺 0.5mlMelamine/HRP 辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記三聚胺
ARL2BP Protein Human 重組人 ARL2BP / BART1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL1R2重組食蟹猴 IL1R2 / IL1RB 蛋白 Protein
CDCP1 Protein Mouse 重組小鼠 CDCP1 蛋白
S100A10重組人 S100A10 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠骨髓來(lái)源巨噬細(xì)胞大鼠骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)試劑盒 ,,英文名: ALP-B ELISA Kit
Rabbit S100B protein (S-100B) ELISA Kit 兔子S100B蛋白(S-100B)試劑盒
氣腫疽梭菌(CC)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMMP-1(HumanMaixmetalloproteinase1)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶1
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-8)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitMYO/MB犬肌紅蛋白