詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
骨髓 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 巨噬細胞樣 | YS-01X7525 |
細胞簡介:
小鼠骨髓單核分離自骨髓,;骨髓是機體的造血組織,,位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓,。紅骨髓能制造紅細胞,、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,,包括細菌、病毒等,;某些淋巴細胞能制造抗體,。因此,骨髓不但是造血器官,,它還是重要的免疫器官,。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,,是一種海綿狀的組織,,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓,。出生時,,紅骨髓充滿全身骨髓腔,隨著年齡增大,,脂肪細胞增多,,相當(dāng)部分紅骨髓被黃骨髓取代,最后幾乎只有扁平骨骨髓腔中有紅骨髓,。骨髓單核細胞是一種未成熟的單核細胞,,在骨髓細胞中約占0.04%,被認為是破骨細胞的前體細胞,,較外周血單個核細胞誘導(dǎo)的破骨細胞得率高,、全骨髓誘導(dǎo)法產(chǎn)生的破骨細胞數(shù)量多,純度高,,較脾細胞誘導(dǎo)法分化效率高,。骨髓單核細胞(BMMNCs)是從股骨或脛骨骨髓中分離提取出來的原代細胞,它屬干細胞類型,。目前,,大多數(shù)研究用淋巴分離液分離提取骨髓單核細胞,,最近也有采用免疫磁珠分離法分離骨髓單核細胞。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠骨髓單核采用密度梯度離心法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠骨髓單核經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 巨噬細胞樣
傳代特性 不增殖,;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬促卵泡素試劑盒 豬促卵泡素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬促卵泡素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬促卵泡素試劑盒,、豬促卵泡素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒 豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬促甲狀腺素釋放激素試劑盒,、豬促甲狀腺素釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬雌二醇受體試劑盒 豬雌二醇受體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬雌二醇受體試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬雌二醇受體試劑盒、豬雌二醇受體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒 豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬傳染性胃腸病毒抗體試劑盒,、豬傳染性胃腸病毒抗體eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬壞死因子α(TNF-α)ELISA 試劑盒
Human melanoma marker (MA/Melan-A) ELISA Kit 人黑色素瘤標(biāo)記物(MA/Melan-A)試劑盒
Rabbitai-glycoproteinaibody,GPELISAKit 兔抗糖蛋白抗體(GP)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforapo-B100(RabbitapoproteinB100)ELISAKit兔載脂蛋白B100
血清/血漿游離脂肪酸酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒10次
Porcinelipoproteinα,Lp-αELISAKit豬脂蛋白α(Lp-α)試劑盒
巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體
抑制素結(jié)合蛋白抗體
ALCAM重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein
ANTXR1 Protein Human 重組人 ANTXR1 蛋白
ENPP2 Protein Mouse 重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
GLP-2(Glucagon-like peptide-2 0.5mgGLP-2(Glucagon-like peptide-2) 胰高血糖素樣肽-2(多肽抗原)
ANTXR1 Protein Human 重組人 ANTXR1 蛋白
ALCAM重組大鼠 ALCAM / CD166 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
ENPP2 Protein Mouse 重組小鼠 Autotaxin / ENPP2 / NPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His 標(biāo)簽) Protein
小鼠骨髓單核細胞大鼠骨形成蛋白6(BMP-6)試劑盒 ,,英文名: BMP-6 ELISA Kit
Rabbit two D dimer (D2D) ELISA Kit 兔子D二聚體(D2D)試劑盒
普氏立克次體(RP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-10(HumanMaixmetalloproteinase10)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶10
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-7)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitDes犬結(jié)蛋白