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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞
組織來(lái)源：骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠骨骼肌成纖維分離自四肢肌肉組織；骨骼肌又稱橫紋肌,，肌肉中的一種,，約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長(zhǎng)柱形的多核細(xì)胞,，肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌，橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,，其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,，有豐富的血管,、淋巴分布，在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,，進(jìn)行隨意運(yùn)動(dòng),。肌肉可根據(jù)共形狀、大小,、位置,、起止點(diǎn)、纖維方向和作用等命名,。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌、三角肌,、梨狀肌等,。骨骼肌成纖維細(xì)胞呈纖維狀，不分支,，有明顯橫紋,，核很多，且都位于細(xì)胞膜下方,。骨骼肌間質(zhì)中有很多成纖維細(xì)胞,。成纖維細(xì)胞是結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái),。成纖維細(xì)胞較大,，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,，其中部分開(kāi)始伸出偽足,，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁,，伸展成梭形,，胞核清晰，分布較均勻,，散在生長(zhǎng),，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞排列緊密,，有的交叉重疊生長(zhǎng),，平坦、胞體較大,，細(xì)胞質(zhì)透明,，細(xì)胞核較大，呈橢圓形,，顏色淡,。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀,；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌成纖維采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠骨骼肌成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白5 英文名稱： human Insulin like Growth Factor Binding Protein 5 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： IGFBP5
胰島素 英文名稱： Human Insulin 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： INS
細(xì)胞間粘附分子1 英文名稱： Human Iercellular Adhesion Molecule 1 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： ICAM-1
干擾素α受體 英文名稱： Human Ierferon α Receptor 規(guī)格： 英文縮寫(xiě)： IFNαR
鴨主要組織相容性復(fù)合體(MHC)ELISA 試劑盒
Human ai prothrombin aibody (aPT1/aPT2) ELISA Kit 人抗凝血素抗體(aPT1/aPT2)試劑盒
HumanInsulieceptorβ,ISR-βELISAKIT 人胰島素受體β(ISR-β)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforACV-A(MouseActivinA)ELISAKit小鼠活化素A
血液組織蛋白酶L(CATHEPSINL)活性熒光定量試劑盒20次
MouseProgesterone,PROGELISAKit小鼠孕激素/孕同(PROG)試劑盒
α-(1,3)-巖藻糖基轉(zhuǎn)移酶 4
胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白1抗體
HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原
IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)
EpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule 0.5mgEpCAM/CD326(Epithelial cell adhesion molecule) 上皮細(xì)胞粘附分子/表皮細(xì)胞粘附分子抗原
CALML3 Protein Human 重組人 CALML3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HGF重組大鼠 HGF / Hepatocyte Growth Factor 蛋白 Protein
LTA4H Protein Mouse 重組小鼠 Leukotriene A4 Hydrolase / LTA4H 蛋白 (His 標(biāo)簽)
IL23重組人 IL-23 (IL23A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
小鼠骨骼肌成纖維細(xì)胞大鼠胱硫醚β-合酶(CBS)試劑盒 ,，英文名： CBS ELISA Kit
Rabbit collagen type III (Col III) ELISA Kit 兔子Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)試劑盒
百日咳桿菌(BP)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMMP-2/GelatinaseAELISAKit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-2)免疫捕獲試劑盒20次
ELISAKitPSA犬前列腺特異性抗原
收到細(xì)胞如何處理？
1,、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代,；若未超過(guò)80%，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作，瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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