詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
睪丸 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7915 |
細胞簡介:
小鼠睪丸間質(zhì)分離自睪丸組織,;睪丸間質(zhì)細胞成群分布在曲精小管之間,,胞體呈圓形,,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,,胞質(zhì)呈嗜酸性,,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,,染色較淡,,有1~2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,,無分泌顆粒,。從青春期開始,睪丸間質(zhì)細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質(zhì)細胞刺激素(黃體生成素)的作用,,能合成分泌雄性激素,,可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持性征和性功能,。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L,;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS,、EGF,、Insulin、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
小鼠睪丸間質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬凋亡相關(guān)因子試劑盒 豬凋亡相關(guān)因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬凋亡相關(guān)因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬凋亡相關(guān)因子試劑盒、豬凋亡相關(guān)因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬試劑盒 豬試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬試劑盒,、豬eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬膽囊收縮素試劑盒 豬膽囊收縮素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬膽囊收縮素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬膽囊收縮素試劑盒,、豬膽囊收縮素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬單核細胞增多性李斯特菌素O試劑盒 豬單核細胞增多性李斯特菌素O試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬單核細胞增多性李斯特菌素O試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬單核細胞增多性李斯特菌素O試劑盒,、豬單核細胞增多性李斯特菌素Oeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒
Human collectin (Collectin) ELISA Kit 人膠原凝集素(Collectin)試劑盒
PorcinePulmonarysurfatca-associatedproteinA,SP-AELISAKit 豬肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha-SCA(HumanAlpha-sarcomericactin)ELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白
血液甲戊二羥酸激酶(mevalonatekinase)活性比色法定量試劑盒20次
Plaphosphatidicacid,PAELISAKit植物凝脂酸(PA)試劑盒
T淋巴細胞轉(zhuǎn)運蛋白1抗體
延胡索酰乙酰乙酸水解酶抗體
CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 Protein
CULLIN (Cdc53/CUL 0.5mgCULLIN (Cdc53/CUL)
NUDT2重組人 NUDT2 / Ap4A hydrolase 蛋白 (His 標簽) Protein
ANXA6 Protein Human 重組人 Annexin VI / ANXA6 蛋白 (His 標簽)
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACTRIIB / ACVR2B 蛋白 (His 標簽)
CULLIN (Cdc53/CUL 0.5mgCULLIN (Cdc53/CUL)
ANXA6 Protein Human 重組人 Annexin VI / ANXA6 蛋白 (His 標簽)
CADM3重組大鼠 CADM3 / NECL1 / IGSF4B 蛋白 Protein
ACVR2B Protein Mouse 重組小鼠 ACTRIIB / ACVR2B 蛋白 (His 標簽)
NUDT2重組人 NUDT2 / Ap4A hydrolase 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠睪丸間質(zhì)細胞大鼠胱天蛋白酶7(CASP7)試劑盒 ,,英文名: CASP7 ELISA Kit
Rabbit ansforming growth factor beta 2 (TGF beta 2) ELISA Kit 兔轉(zhuǎn)化生長因子β2(TGFβ2)試劑盒
(OC43/HKU1)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMMP-3(HumanMaixmetalloproteinase3)ELISAkit人基質(zhì)金屬蛋白酶3
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)
ELISAKiBP犬醇結(jié)合蛋白