詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠肝枯否細(xì)胞
組織來(lái)源:肝臟組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形,、巨噬細(xì)胞
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 (12mM)
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠枯否分離自肝臟組織,;肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官,,并在身體里面起著去氧化,、儲(chǔ)存肝糖,、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用;肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁,。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官,,位于機(jī)體中的腹部位置,在右側(cè)橫隔膜之下,,位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方,,胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺,,為一紅棕色的V字形器官,。肝臟是尿素合成的主要器官,又是新陳代謝的重要器官,。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu):肝臟位于右上腹,,隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面,大部分肝為肋弓所復(fù)蓋,,僅在腹上區(qū),、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁,肝上面則與膈及腹前壁相接,??莘袷霞?xì)胞(Kupffer細(xì)胞)是肝臟的肝血竇內(nèi)一些固定于竇壁的巨噬細(xì)胞,它能吞噬和清除大部分從腸道來(lái)的抗原微粒,,并能吞噬和清除肝血竇中的細(xì)菌,、異物和衰老的紅細(xì)胞,并把血紅蛋白分解成,。此外,,肝巨噬細(xì)胞也有處理抗原,誘導(dǎo)T細(xì)胞增殖,,參與免疫調(diào)節(jié)的作用,。枯否氏細(xì)胞和一般巨噬細(xì)胞不同,枯否氏細(xì)胞不具有增加抗原免疫原性的能力,,相反有消除或減弱抗原性的作用,。枯否氏細(xì)胞能吞噬來(lái)自血液循環(huán)的抗原抗體復(fù)合物和其他有害物質(zhì),,以消除這些物質(zhì)對(duì)機(jī)體的損害,。枯否細(xì)胞功能障礙可導(dǎo)致腸源性?xún)?nèi)毒素血癥,。電鏡下有很多皺褶和微絨毛,。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝枯否采用混合酶灌流消化、低速離心,、密度梯度離心,、差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肝枯否經(jīng)CD68免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對(duì)于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請(qǐng)拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,,鏡檢、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),;建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài),。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,,可正常傳代,;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松,。
6,、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時(shí),,若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
氧化酶(XOD)測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/48樣
葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/48樣
多酚氧化酶(PPO)測(cè)試盒 可見(jiàn)分光光度法 50管/24樣
蛋白質(zhì)羰基測(cè)試盒 紫外分光光度法 50管/24樣
鴨白介素4(IL-4)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai ganglioside aibody (GM1) ELISA Kit 人抗抗體(GM1)試劑盒
HumanSubstanceP,SPELISAKit 人p物質(zhì)(SP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAChRab(Mouseacetylcholinereceptoraibody)ELISAKit小鼠乙酰受體抗體
鹽酸化學(xué)法石蠟切片抗原修復(fù)處理試劑盒50次
Mousepituitaryadenylatecyclaseactivatingpolypeptide,PACAPELISAKit小鼠垂體腺苷酸環(huán)化酶激活肽(PACAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
SLC19A2抗體
嗅覺(jué)受體5M11抗體
CTNNB1重組小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)重組蛋白 Recombinant Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
PSME2重組人 PSME2 / PA28b 蛋白 Protein
CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
ACVRL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF1α)重組蛋白 Recombinant Hypoxia Inducible Factor 1 Alpha (HIF1a)
CAMKV Protein Human 重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
CTNNB1重組小鼠 beta-Catenin / CTNNB1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
ACVRL1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
PSME2重組人 PSME2 / PA28b 蛋白 Protein
小鼠肝枯否細(xì)胞大鼠胱抑素SA(CST2)試劑盒 ,,英文名: CST2 ELISA Kit
Rabbit apolipoprotein B100 (apo-B100) ELISA Kit 兔載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒
甲型流感病毒H3亞型(IAV-H3)核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMMP-7ELISAkit大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶7
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP-10)活性熒光定量試劑盒20次
ELISAKitICAM-1/CD54犬細(xì)胞間粘附分子1