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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7000 |
細胞簡介：
小鼠肺血管平滑肌分離自肺組織,；肺是機體的呼吸器官,，位于胸腔，左右各一,，覆蓋于心之上,。肺有分葉，左二右三,，共五葉,。肺經(jīng)肺系（指氣管、支氣管等）與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。肺血管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一,，呈梭形,、不規(guī)則形、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細胞匯合,，多數(shù)細胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細胞密度低時,，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時,，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,，4-6天即可匯合,，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能：①細胞表面表達介質(zhì)（ICAM-1和VCAM-1）參與血管壁炎癥反應,；②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細胞,。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化：①平滑肌增生易致肺動脈高壓；②先天性肺動脈狹窄,；③肺動脈栓塞,。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素，最新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,，并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關,。
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,，應將原代細胞換液,；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠肺血管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的小鼠肺血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%,；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%,，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
鴨免疫球蛋白E(IgE)ELISAKit ELISA. 96T/48T
鴨主要組織相容性復合體(MHC)ELISAKit ELISA. 96T/48T
鴨病毒性腸病毒(DEV)ELISAKit ELISA. 96T/48T
鴨白介素6(IL-6)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠總蛋白(TP)試劑盒 96T/48T
Human ai sperm aibody (glycolipid) ELISA Kit 人抗糖脂抗體(glycolipid)試劑盒
HumanE1/ubiquitin-activatingenzyme,E1/UBAEELISAKit 人泛素激活酶(E1/UBAE)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACEELISAKit大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶
藥品糖精(saccharin)含量薄層色譜法定性試劑盒20次
Mousepara-aminobenzoicacid,PABAELISAKit小鼠對(PABA)試劑盒規(guī)格：96T/48T
RAS癌基因家族蛋白RAB40B抗體
鋅指蛋白738抗體
TGFB1重組狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 Protein
Nestin 巢蛋白(神經(jīng)上皮干細胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神經(jīng)上皮干細胞蛋白)(抗原)
L10重組人 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
CASP3 Protein Human 重組人 CASP3 / Caspase-3 / CASP-3 蛋白
CSK Protein Mouse 重組小鼠 CSK / C-Src kinase 蛋白
Nestin 巢蛋白(神經(jīng)上皮干細胞蛋白 0.5mgNestin 巢蛋白(神經(jīng)上皮干細胞蛋白)(抗原)
CASP3 Protein Human 重組人 CASP3 / Caspase-3 / CASP-3 蛋白
TGFB1重組狗 TGF-beta 1 / TGFB1 蛋白 Protein
CSK Protein Mouse 重組小鼠 CSK / C-Src kinase 蛋白
L10重組人 IL10 / Interleukin-10 蛋白 Protein
小鼠肺血管平滑肌細胞大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒 ，英文名： PPAR-α ELISA Kit
Rabbit acetylcholine (ACh) ELISA Kit 兔乙酰(ACh)試劑盒
柯薩奇病毒A16型(CAV-16)核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMMSAM(Humanmelanomametastasissurfaceadhesionmolecule)ELISAKit人黑色素瘤轉(zhuǎn)移表面黏附分子
體液基質(zhì)金屬蛋白酶(MMP)總活性比色法定量試劑盒20次
ELISAKitFA犬
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