詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,,不直接用于食品,、藥品、臨床或動物的診斷或治療,!
產(chǎn)品名稱:小鼠肺微血管平滑肌細(xì)胞
組織來源:肺
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,,含FBS、EGF,、bFGF,、IGF,、VEGF、Heparin,、Hydrocortisone、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):成纖維細(xì)胞樣
傳代特性:可傳1-2代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
小鼠肺微血管平滑肌體外培養(yǎng)周期有限,;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),,以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài),。
細(xì)胞簡介:
小鼠肺微血管平滑肌分離自肺組織,;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,,左右各一,,覆蓋于心之上。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅,。肺血管平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏,;細(xì)胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點。肺血管平滑肌細(xì)胞主要功能:①細(xì)胞表面表達(dá)介質(zhì)(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應(yīng),;②是多數(shù)重要動脈疾病的靶細(xì)胞,。肺血管平滑肌細(xì)胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄,;③肺動脈栓塞,。血管平滑肌細(xì)胞的加速生長潛能是血管疾病進(jìn)展的關(guān)鍵因素,最新研究表明血管平滑肌細(xì)胞表達(dá)的ICAM-1和VCAM-1能促進(jìn)血管壁的炎癥反應(yīng),,并且與血管疾病的發(fā)展及穩(wěn)定性有關(guān),。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠肺微血管平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白介素1受體拮抗劑試劑盒 豬白介素1受體拮抗劑試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬白介素1受體拮抗劑試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豬白介素1受體拮抗劑試劑盒,、豬白介素1受體拮抗劑eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬白介素1β試劑盒 豬白介素1β試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬白介素1β試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬白介素1β試劑盒,、豬白介素1βeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬白介素1α試劑盒 豬白介素1α試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬白介素1α試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豬白介素1α試劑盒、豬白介素1αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬γ干擾素試劑盒 豬γ干擾素試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬γ干擾素試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,來源:試劑盒(進(jìn)口分裝),,產(chǎn)品別名:豬γ干擾素試劑盒,、豬γ干擾素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬氧化酶(DAO)ELISA 試劑盒
Human Staphylococcus aureus eerotoxins (SE) ELISA Kit 人金葡菌腸毒素(SE)試劑盒
PorcineHydrocoisone,HYDELISAKit 豬輕化1(HYD)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlpha2-MG(HumanAlpha2macroglobulin)ELISAKit人α2巨球蛋白
血液(lithium)化學(xué)比色法定量試劑盒50次
NudemouseAlpha-fetoprotein,AFPELISAKit裸鼠甲種胎兒球蛋白/甲胎蛋白(AFP)試劑盒
P物質(zhì)受體抗體
鋅指蛋白550抗體
CD40重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 Protein
G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein 0.5mgG Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白(鳥苷酸結(jié)合蛋白)(抗原)
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白
NEGR1 Protein Mouse 重組小鼠 NEGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
G Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein 0.5mgG Protein(Guanine nucleotide-binding regulatory protein) G蛋白(鳥苷酸結(jié)合蛋白)(抗原)
AMPK Protein Human 重組人 AMPK (G1/B2/A2) Heterotrimer 蛋白
CD40重組大鼠 CD40 / TNFRSF5 蛋白 Protein
NEGR1 Protein Mouse 重組小鼠 NEGR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FAM3D重組人 FAM3D 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
小鼠肺微血管平滑肌細(xì)胞大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)試劑盒 ,,英文名: PPARγ ELISA Kit
Rat 8 hydroxydeoxyguanosine (8-OHdG) ELISA Kit 大鼠8羥基脫氧鳥苷(8-OHdG)試劑盒
Ratinsulinaoaibodies,IAAELISAKit 大鼠胰島素自身抗體(IAA)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforeNOS(RabbitEndothelialniicoxidesyhase)ELISAKit兔內(nèi)皮型合成酶
細(xì)胞氯乙?;D(zhuǎn)移酶(CAT)報告基因活性同位素定量試劑盒20次
RatLeptin,LEPELISAKit大鼠瘦素(LEP)試劑盒
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細(xì)胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分至2個細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細(xì)胞密度未超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時再進(jìn)行傳代操作