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詳細介紹
商品屬性：
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 內皮細胞樣 | YS-01X6994 |
細胞簡介：
小鼠肺微血管內皮分離自肺組織,；肺是機體的呼吸器官，位于胸腔,，左右各一,，覆蓋于心之上。肺有分葉,，左二右三,，共五葉。肺經肺系（指氣管,、支氣管等）與喉,、鼻相連,，故稱喉為肺之門戶，鼻為肺之外竅,。微血管內皮細胞密切參與包括再生,、發(fā)育、傷口愈合等一系列生理及炎癥反應,。細胞呈梭形或多角形,，形成單層后呈鵝卵石樣或鋪路石樣排列。肺微血管內皮細胞構成半選擇性屏障,，該屏障對于肺氣體交換,，調節(jié)液體和可溶物在血液與肺間質之間的流動具有重要意義。
方法簡介：
公司實驗室分離的小鼠肺微血管內皮采用組織貼塊法并結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,，細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測：
公司實驗室分離的小鼠肺微血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上,，且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息：
包被條件 PLL（0.1mg/ml）,，明膠（0.1%）
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 內皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘,，棄去上清液,，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,； 1．細胞凍存時,，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,，細胞變圓脫落后,，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數板計數,。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,，按每1ml的數量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存,。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱,，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層,，以利于組織塊粘著于瓶壁,，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞,、淋巴細胞,、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,，可采用低速離心分離,，直接培養(yǎng),，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,，可用于重點觀察細胞間的聯系,、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品：
豬白介素2(IL-2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素1β(IL-1β)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬白介素1α(IL-1α)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬肺表面活性物質相關蛋白A(SP-A)ELISA 試劑盒
Human a disiegrin and metalloproteinase 8 (ADAM8) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒
Porcineniicoxide,NOELISAKit 豬血清(NO)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-PI(HumanAlpha2-plasmininhititor)ELISAKit人α2纖溶酶抑制物
血液酪酶(tyrosinase)活性比色法定量試劑盒20次
NudeMouseClaracellprotein,CC16ELISAKit裸鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)試劑盒
PRDM鋅指轉錄因子PRDM16抗體
鋅指蛋白403/喉癌相關蛋白1抗體
HA重組甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) ?？窠浂舅?span>(35肽)
S100A9重組人 S100A9 / CAGB / P14 蛋白 Protein
AMTN Protein Human 重組人 AMTN / Amelotin 蛋白
LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白
ShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin 0.1mgShK(Stichodactyla helianthus Neurotoxin)-(Dap22) 海葵神經毒素(35肽)
AMTN Protein Human 重組人 AMTN / Amelotin 蛋白
HA重組甲型流感 H11N9 (A/mallard/Alberta/294/1977) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標簽) Protein
LXN Protein Human 重組人 Latexin / LXN / TCI 蛋白
S100A9重組人 S100A9 / CAGB / P14 蛋白 Protein
小鼠肺微血管內皮細胞大鼠過氧化物酶體增殖物激活受體γ輔激活因子1α(PPARγC1α)試劑盒 ,，英文名： PPARγC1α ELISA Kit
Rat 6 keto prostaglandin F1a (6-keto-PGF1a) ELISA Kit 大鼠6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)試劑盒
RatAi-glucoprotein210,GP210ELISAKit 大鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforeNOSELISAKit大鼠內皮型合成酶
細胞氯乙?；D移酶(CAT)報告基因活性同位素薄層色譜(TLC)試劑盒20次
RatLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit大鼠鉤端IgG(LepIgG)試劑盒
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,，以盡量除去消化液的毒性；
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,，至少為5×108細胞/L；
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,，漂浮,；
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀，應將原代細胞換液,；
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,；
2,、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,；
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗,；
4,、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子,，白血病細胞中要加入少量的原患者血清,，以利細胞生長；
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行
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