詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
肺動脈組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7056 |
細胞簡介:
小鼠肺動脈成纖維分離自肺動脈組織,;肺動脈亦稱肺動脈干,。在呼吸空氣的脊椎動物中,,把靜脈血由心臟導向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,,在主動脈之前向左上后方斜行,,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,,經(jīng)肺門入肺,。肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干,。起自右心室,,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左,、右肺動脈,。左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,,分二支進入左肺上,、下葉。右肺動脈較長而粗,,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,,至右肺門處分為三支進入右肺上、中,、下葉,。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來,;成纖維細胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細胞對不同程度的細胞變性,、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團;細胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦、胞體較大,,細胞質(zhì)透明,,細胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。肺動脈成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài);合成和釋放細胞外基質(zhì),;組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠肺動脈成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠肺動脈成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存,。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞、淋巴細胞,、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬去甲上腺素(NE)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬(HYD)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬前列環(huán)素(PGI2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白2(GL2)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
豬熱休克蛋白90(HSP-90)ELISA 試劑盒
Very low density lipoprotein receptor (VLDLR) ELISA Kit 人極低密度脂蛋白受體(VLDLR)試劑盒
guineapigLeukoieneB4,LT-B4ELISAKit 豚鼠白三烯B4(LTB4)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANG-IIELISAKit大鼠血管緊張素Ⅱ
血液脯氨酰肽酶(prolinase)比色法定量試劑盒20次
PorcineDexamethasone,DexELISAKit豬(Dex)試劑盒
PerCP-Cy5.5標記人CD79a單克隆抗體
心臟肌球蛋白結(jié)合蛋白抗體
PTPRC重組人 CD45 / PTPRC 蛋白 Protein
0脂爬行酶2(PLSCR2)重組蛋白 Recombinant Phospholipid Scramblase 2 (PLSCR2)
PPT1重組人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 蛋白 (His 標簽) Protein
AXL Protein Human 重組人 Axl Kinase 蛋白 (His 標簽)
NP Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標簽)
0脂爬行酶2(PLSCR2)重組蛋白 Recombinant Phospholipid Scramblase 2 (PLSCR2)
AXL Protein Human 重組人 Axl Kinase 蛋白 (His 標簽)
PTPRC重組人 CD45 / PTPRC 蛋白 Protein
NP Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP) (His 標簽)
PPT1重組人 PPT1 / Palmitoyl-protein thioesterase 1 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠肺動脈成纖維細胞大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶1(Tie-1)試劑盒 ,英文名: Tie-1 ELISA Kit
Rabbit plasmin aiplasmin complex (PAP) ELISA Kit 兔纖溶酶抗纖溶酶復合物(PAP)試劑盒
腸道病毒EV71核酸試劑盒(-PCR法) 48T
CLIAKitforMouseAngiotensinconveingenzyme,ACEELISAKit小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶
體液肌酸激酶同工酶腦型(CK--BB)活性比色法定量試劑盒25次
ELISAKitHBsAg犬乙型肝表面抗原
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,,至少為5×108細胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行