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產(chǎn)品名稱：小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞

組織來源：肺靜脈組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%,；CO2,，5%

細(xì)胞簡介：

小鼠肺大靜脈平滑肌分離自肺大靜脈組織；肺大靜脈在用肺呼吸的脊椎動物中,，把動脈血由肺送回心臟的靜脈,，是一個(gè)靜脈里流動脈血的血管。左右1對,，共4條,，兩條連接右肺，兩條連接左肺,。肺靜脈異位引流是指肺靜脈未能直接與左心房連接,，而與右心房或體靜脈系統(tǒng)連接的先天性心血管異位。肺靜脈淤血性肺動脈高壓,，是由于肺靜脈內(nèi)血液淤滯而引起的肺動脈高壓,。正常情況下，肺循環(huán)具有血壓低,、阻力小和順應(yīng)性大的特點(diǎn)，肺動脈壓力高低取決于單位時(shí)間內(nèi)肺動脈血流量和肺血管的阻力,，要維持肺循環(huán)的低壓,、低阻的狀態(tài)，必須保證整個(gè)肺循環(huán)系統(tǒng)的暢通無阻,，血液順利地由肺動脈經(jīng)毛細(xì)血管進(jìn)入肺靜脈,，再入左心室，經(jīng)過左心室收縮進(jìn)入體循環(huán),，才能避免肺動脈內(nèi)壓力升高,。肺大靜脈平滑肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細(xì)胞貼壁伸展,，細(xì)胞形態(tài)大小不一,，呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,，核卵圓形,、居中；2周后細(xì)胞匯合,，多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,，胞漿豐富，有分枝狀突起,，細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,，高低起伏；細(xì)胞密度低時(shí),，常交織成網(wǎng)狀,；密度高時(shí)，則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點(diǎn),。該細(xì)胞參與血管壁炎癥反應(yīng),，保持靜脈管腔的通暢，還是多數(shù)動脈疾病的靶細(xì)胞,。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺大靜脈平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺大靜脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上,，且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)步驟：

一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度,。

二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。

a）,、對于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

1. 棄去培養(yǎng)上清,，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。

4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。

b）,、對于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：

方法一：收集細(xì)胞,，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。

方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后,，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

收到細(xì)胞如何處理,？

1、首先,，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,。若有,，請拍照，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,。

2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,，部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。

3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例、換液頻率等,。

4,、靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,，鏡檢,、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）,；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照、記錄細(xì)胞生長狀態(tài),。

5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長密度超過80%，可正常傳代,；若未超過80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松。

6,、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作

公司正在出售的產(chǎn)品：

組織因子抑制物 (TFPI)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 - a (TGF -a )   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 -β1(TGF- b 1)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

轉(zhuǎn)移生長因子 -β2(TGF- b 2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

組裝/原裝

Rat low density lipoprotein immune complexes (LDL-IC) ELISA Kit 大鼠低密度脂蛋白免疫復(fù)合物(LDL-IC)試劑盒

Humaeceptorforadvancedglycationendproducts,RAGE/AGERELISAKit 人晚期糖基化終末產(chǎn)物受體(RAGE/AGER)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitfor16-AlphaOHE-1(Mouse16-AlphaHydroxyesogen1)ELISAKitHpt/HP小鼠16α羥基雌同1

飲料鎂離子濃度化學(xué)比色法定量試劑盒20次

MouseLeptin,LEPELISAKit小鼠瘦素(LEP)試劑盒

PE-Cy7標(biāo)記人CD38單克隆抗體

小鼠抗人CD20單克隆抗體

CXCL16重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

C7 Protein Human 重組人 C7 / Complement component 7 蛋白

TNFRSF13C Protein Mouse 重組小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 蛋白

H1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin 0.5mgH1N1(Influenza A virus ,hemagglutinin) 流感病毒A抗原

C7 Protein Human 重組人 C7 / Complement component 7 蛋白

CXCL16重組大鼠 CXCL16 / SR-PSOX 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF13C Protein Mouse 重組小鼠 BAFFR / TNFRSF13C / CD268 蛋白

PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

小鼠肺大靜脈平滑肌細(xì)胞大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪酸激酶2(Tie-2)試劑盒 ，英文名： Tie-2 ELISA Kit

Rabbit glycated hemoglobin A1c (GHbA1c) ELISA Kit 兔糖化血紅蛋白A1c(GHbA1c)試劑盒

腸道病毒EV71核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMouseangiotensionII,ANG-IIELISAKit小鼠血管緊張素Ⅱ

體液肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次

ELISAKitPROG犬孕激素/孕同