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小鼠肺成纖維細(xì)胞

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更新時(shí)間:2024-11-04 10:36:05瀏覽次數(shù):190

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) YS-01X7024 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
小鼠肺成纖維細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:MAMDC2蛋白抗體 鋅指蛋白5抗體 Syndecan 3蛋白抗體 小鼠肺微血管平滑肌細(xì)胞 大鼠脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 KMS-34人多發(fā)性骨髓瘤細(xì)胞 22RV1 (人前列腺癌細(xì)胞)

詳細(xì)介紹

小鼠肺成纖維細(xì)胞

小鼠肺成纖維細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

肺組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7024

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

小鼠肺成纖維分離自肺組織,;肺是機(jī)體的呼吸器官,,位于胸腔,,左右各一,覆蓋于心之上,。肺有分葉,,左二右三,共五葉,。肺經(jīng)肺系(指氣管,、支氣管等)與喉、鼻相連,,故稱喉為肺之門戶,,鼻為肺之外竅。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來,;成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),,其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用,。剛分離的肺成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中,。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起,;6h后細(xì)胞基本貼壁,伸展成梭形,,胞核清晰,,分布較均勻,散在生長(zhǎng),,不聚集成團(tuán),;細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,,有的交叉重疊生長(zhǎng),,平坦、胞體較大,,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。肺成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺器官的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織,。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠肺成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑,、Penicillin,、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳3-5

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%

小鼠肺成纖維細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用,、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

 ?、芷鞴倥囵B(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。

小鼠肺成纖維細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

豬流感病毒通用型(SIV-U)核酸試劑盒(-PCR)   48T

馬流感病毒H3N8(EIV-H3N8)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法)   48T

馬流感病毒H3N8(EIV-H3N8)核酸試劑盒(-PCR)   48T

豬內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒

Human thyroxine binding globulin (TBG) ELISA Kit 人甲狀腺結(jié)合球蛋白(TBG)試劑盒

guineapigansforminggrowthfactorβ1,TGF-β1ELISAKit 豚鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAmylinELISAKit大鼠胰淀素

血液S轉(zhuǎn)移酶(GSHST)總活性比色法定量試劑盒20

PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit豬載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒

p53調(diào)控PA26核蛋白抗體

線粒體融合蛋白1抗體

CD38重組食蟹猴 SCARB3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

IL-7(Interleukin-7 0.5mgIL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原

LYPD3重組人 C4.4A / LYPD3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ASF1B Protein Human 重組人 ASF1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

S100A1 Protein Mouse 重組小鼠 S100A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

IL-7(Interleukin-7 0.5mgIL-7(Interleukin-7) 白介素7抗原

ASF1B Protein Human 重組人 ASF1B 蛋白 (His 標(biāo)簽)

CD38重組食蟹猴 SCARB3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

S100A1 Protein Mouse 重組小鼠 S100A1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LYPD3重組人 C4.4A / LYPD3 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

小鼠肺成纖維細(xì)胞大鼠和肽素(copeptin)試劑盒 ,,英文名: copeptin ELISA Kit

Rabbit renin (Renin) ELISA Kit 兔腎素(Renin)試劑盒

綠膿桿菌(PA)核酸試劑盒 48T

CLIAKitforMouseAi-nuclearAibody,ANAELISAKit小鼠抗核抗體

體液肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性比色法定量試劑盒25

ELISAKitMHC/DLA犬主要組織相容性復(fù)合體

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;

  2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;

  7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;

  8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。

  二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞,;

  2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4,、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長(zhǎng),;

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;

  6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行


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