詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
骨骼肌組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7738 |
細(xì)胞簡介:
小鼠腓腸肌分離自小腿肌肉組織,;腓腸肌位于小腿后面的皮下,,是一個淺表的肌肉,當(dāng)人體站立時,,可以在小腿后面看到隆起肌肉的輪廓就是腓腸肌,。腓腸肌為小腿后側(cè)群淺組肌肉,有內(nèi),、外二頭,,內(nèi)側(cè)頭起自股骨內(nèi)側(cè)髁上的三角形隆起,外側(cè)頭起自股骨外側(cè)髁的近側(cè)端,,在二頭的深面各有一滑膜囊,。腓腸肌的二肌腹增大,在腘窩下角彼此鄰近,,所成夾角多為25°~30°,,此肌下行與比目魚肌移行為跟腱,止于跟骨結(jié)節(jié),。腓腸肌的動脈發(fā)自腘動脈,、靜脈與動脈伴行,注入腘靜脈或小隱靜脈,。腓腸肌的神經(jīng)全部來自脛神經(jīng),。包括內(nèi),、外側(cè)肌神經(jīng)。腓腸肌在行走及站立時能提足跟向上,,直立時,,腓腸肌和比目魚肌都參加強固膝關(guān)節(jié),并調(diào)節(jié)小腿和足的位置,。脛前皮膚缺損或深部竇道及瘢痕,,可以切取腓腸肌內(nèi)側(cè)頭及其皮面皮膚所形成的肌皮瓣向前旋轉(zhuǎn)。腓腸肌還可影響足的縱弓,,該肌癱瘓或時,,足縱弓將加深。該肌由脛神經(jīng)支配,,股骨髁上骨折時,,因腓腸肌收縮遠(yuǎn)側(cè)端常自后移位。腓腸肌是脛骨和腓骨后面的一塊肌肉,。腓腸肌細(xì)胞屬于骨骼肌細(xì)胞的一種,,骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,,約占全身重量的40%,。骨骼肌纖維為長柱形的多核細(xì)胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附,。屬于橫紋肌,,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢,。每塊肌肉都是具有一定形態(tài),、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管,、淋巴分布,,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動,。肌肉可根據(jù)共形狀,、大小、位置,、起止點,、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌,、菱形肌,、三角肌、梨狀肌等,。骨骼肌細(xì)胞呈纖維狀,,不分支,,有明顯橫紋,核很多,,且都位于細(xì)胞膜下方,。肌細(xì)胞內(nèi)有許多沿細(xì)胞長軸平行排列的細(xì)絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶),。明帶染色較淺,,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線,。H線的中部有一M線,。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線,。兩個Z線之間的區(qū)段,,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細(xì)胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細(xì)胞貼壁伸展,,細(xì)胞形態(tài)大小不一,呈梭形,、不規(guī)則形,、三角形或扇形,核卵圓形,、居中,;2周后細(xì)胞匯合,多數(shù)細(xì)胞伸展呈長梭形,,胞漿豐富,,有分枝狀突起,細(xì)胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,,高低起伏;細(xì)胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀,;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀,。傳代后細(xì)胞生長較快,,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學(xué)特征和生長特點,。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞,;
2、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進行分瓶試驗,;
4、長期培養(yǎng)時,,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腓腸肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腓腸肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳3-5代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化,。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進行細(xì)胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,,如白血病細(xì)胞,、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬白細(xì)胞間介素10 英文名稱: Porcine Ierleukin 10 規(guī)格: 英文縮寫: IL-10
豬白細(xì)胞間介素1β 英文名稱: Porcine Ierleukin 1β 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1β
豬白細(xì)胞間介素 1 英文名稱: Porcine Ierleukin 1 規(guī)格: 英文縮寫: IL-1
豬白細(xì)胞間介素2 英文名稱: Porcine Ierleukin 2 規(guī)格: 英文縮寫: IL-2
豬干擾素γ(IFN-γ)ELISA 試劑盒
Human a disiegrin and metalloproteinase 10 (ADAM10) ELISA Kit 人解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)試劑盒
PorcineEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit 豬內(nèi)皮型合成酶(eNOS)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAlpha2-PI(MouseAlpha2-plasmininhititor)ELISAKit小鼠α2纖溶酶抑制物
血液賴(lysine)含量熒光定量試劑盒20次
Nudemousecyclooxygenase-2,COX-2ELISAKit裸鼠環(huán)加氧酶2(COX-2)試劑盒
ORC3蛋白抗體
線粒體核糖體蛋白S16抗體
LON PROTEASE重組大腸桿菌 Lon protease 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mgTNF-alpha 壞死因子-α抗原
TNK2重組人 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
AMY2B Protein Human 重組人 AMY2B 蛋白
NGF Protein Human 重組人 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
TNF-alpha 壞死因子-α抗原 0.5mgTNF-alpha 壞死因子-α抗原
AMY2B Protein Human 重組人 AMY2B 蛋白
LON PROTEASE重組大腸桿菌 Lon protease 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
NGF Protein Human 重組人 β-NGF / Beta-NGF 蛋白
TNK2重組人 ACK1 / TNK2 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠腓腸肌細(xì)胞大鼠核呼吸因子1(F1)試劑盒 ,,英文名: F1 ELISA Kit
Rat 5 hydroxyyptamine (5-HT) ELISA Kit 大鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒
RatleukoieneE4,LT-E4ELISAKit 大鼠白三烯E4(LTE4)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforeNOS-3(HumanAlpha1-Acidglycoprotein)ELISAKit人內(nèi)皮型合成酶3
細(xì)胞0脂酶D2(PhospholipaseD2)水解活性比色法定量試劑盒20次
RatLeukoieneC4,LT-C4ELISAKit大鼠白三烯C4(LTC4)試劑盒