詳細介紹
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:小鼠腸系膜平滑肌細胞
組織來源:腸系膜組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳2-3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%,;CO2,5%
細胞簡介:
小鼠腸系膜平滑肌分離自腸系膜動脈組織,;腸道指的是從胃幽門至的消化管,。腸是消化管中最長的一段,也是功能最重要的一段,。哺乳動物的腸包括小腸,、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內進行的,,大腸主要濃縮食物殘渣,,形成糞便,再通過直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化,、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,,其實它的功能還遠不止此——它還是機體內最大的微生態(tài)系統(tǒng),。腸系膜動脈由背大動脈發(fā)出的走行在腸系膜內,分布于消化管的動脈,。分成腸系膜上動脈和腸系膜下動脈,。前者主要分布于小腸左側,后者分布于結腸,、大腸,、泄殖腔等處。腸動脈平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,,可見細胞貼壁伸展,,細胞形態(tài)大小不一,,呈梭形、不規(guī)則形,、三角形或扇形,,核卵圓形、居中,;2周后細胞匯合,,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,,有分枝狀突起,,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏,;細胞密度低時,,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,,4-6天即可匯合,,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠腸系膜平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠腸系膜平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)步驟:
一,、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻,。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻,。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或將細胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度,。
二,、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b),、對于懸浮細胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄上清液,,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
收到細胞如何處理?
1,、首先,,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時與技術支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù)),。
2,、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài),。因運輸問題,,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng)2-4小時,,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3,、仔細閱讀細胞說明書,,了解細胞相關信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基,、血清比例,、所需細胞因子、傳代比例,、換液頻率等,。
4、靜置完成后,,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng)基,,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內液體全部轉移至50ml無菌離心管內,,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸,。鏡檢時,,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內培養(yǎng),,補加培養(yǎng)基至5ml,;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
總脂酶檢測 Liver / muscle glycogen detection
肝脂酶/脂蛋白脂酶檢測 Lipofuscin (excluding colorimeic detection)
肝/肌糖元檢測 Lipofuscin (including colorimeic detection)
脂褐質(不包括比色)檢測 Free fatty acids (NEFA) detection
豬組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)ELISA 試劑盒
Factor of human peroxisome proliferator activated receptor gamma (PPAR- gamma) ELISA Kit 人過氧化物酶體增殖因子活化受體γ( PPAR-γ)試劑盒
RabbitIerleukin2,IL-2ELISAKit 兔子白介素2(IL-2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforApo-HELISAKit大鼠載脂蛋白H
溴脫氧尿核苷(BrdU)溶液(10毫摩爾)1毫升
PorcineMethemoglobin,MHBELISAKit豬高鐵血紅蛋白(MHB)試劑盒
MRS2蛋白抗體
細胞因子受體樣因子3抗體
HAVCR2重組小鼠 TIM-3 / HAVCR2 蛋白 (His 標簽) Protein
谷半胱連接酶(GCLM)重組蛋白 Recombinant Glutamate Cysteine Ligase, Modifier Subunit (GCLM)
SPHK1重組人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白 Protein
C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)
IL13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL13 / ALRH 蛋白
Lin-28同源物A(LIN28A)重組蛋白 Recombinant Lin-28 Homolog A (LIN28A)
C1QBP Protein Human 重組人 HABP1 / C1QBP / GC1QBP 蛋白 (His 標簽)
IL12A & IL12B重組小鼠 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白 Protein
GPT Protein Rat 重組大鼠 GPT1 / GPT 蛋白 (His 標簽)
RCN3重組人 RCN3 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠腸系膜平滑肌細胞大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)試劑盒 ,,英文名: IKBα ELISA Kit
Rabbit heat shock protein 20 (HSP-20) ELISA Kit 兔熱休克蛋白20(HSP-20)試劑盒
麻疹病毒(MV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T
CLIAKitforMousecarcinoembryonicaign,CEAELISAKit小鼠癌胚抗原
體液肌酸激酶(CK)活性酶動力比色法定量試劑盒25次
ELISAKit11-DH-TXB2人11去氫血栓烷B2