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本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,，不直接用于食品,、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療,！
產(chǎn)品名稱：小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞
組織來(lái)源：腸組織
產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息：
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基 含FBS,、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣,，95%；CO2,，5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
小鼠腸黏膜上皮分離自腸道組織,；腸道指的是從胃幽門至的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,，也是功能最重要的一段,。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段,。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,，大腸主要濃縮食物殘?jiān)纬杉S便,，再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外,。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,，以提供足夠的養(yǎng)分,，其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸黏膜上皮細(xì)胞是機(jī)體內(nèi)外環(huán)境的重要屏障,，持續(xù)暴露于大量抗原中,，也是機(jī)體面對(duì)病原微生物的道防線。因此,，腸黏膜上皮細(xì)胞除有吸收,、分泌和轉(zhuǎn)運(yùn)等重要生理功能之外，在黏膜先天性和獲得性免疫防御機(jī)制中也起著重要作用,。腸黏膜上皮細(xì)胞作為首先接觸抗原的細(xì)胞,，在黏膜免疫反應(yīng)的起始階段發(fā)揮關(guān)鍵作用，它決定黏膜免疫反應(yīng)的發(fā)生,、性質(zhì)和強(qiáng)度,。
方法簡(jiǎn)介：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮采用先機(jī)械分離法、后膠原酶消化法并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測(cè)：
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠腸黏膜上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定,，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟：
一,、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,，棄去上清液,，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中）,，培養(yǎng)過(guò)夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）,、對(duì)于貼壁細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣,、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,，脫落后吸出,，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液,，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）,、對(duì)于懸浮細(xì)胞,，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘,，棄上清液,，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中,。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式,，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起,，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品：
豬白細(xì)胞間介素8 英文名稱： Porcine Ierleukin 8 規(guī)格： 英文縮寫： IL-8
豬N乙酰βD基葡萄糖苷酶 英文名稱： Porcine N-Acetyl Beta D Glucosaminidase 規(guī)格： 英文縮寫： NAGase
豬γ干擾素 英文名稱： Porcine γ Ierferon 規(guī)格： 英文縮寫： γ IFN
豬受體5 英文名稱： Porcine Somatostatin Receptor 5 Elisa Kit 規(guī)格： 英文縮寫： SS5
豬剛地弓形蟲(T.gondii)ELISA 試劑盒
Human ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 人睫狀神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子(CF)試劑盒
Porcineacetylcholinereceptoraibody,AChRabELISAKit 豬乙酰受體抗體(AChRab)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAlphaENOL(HumanAlpha-enolase)ELISAKit人α烯醇化酶
血液賴(lysine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次
Peanagglinin,PNAELISAKit花生凝集素(PNA)試劑盒
LIMS3蛋白抗體
細(xì)胞命運(yùn)決定因子DACH1抗體
APOA1重組人 ApoAI 蛋白 Protein
結(jié)合珠蛋白(Hpt)重組蛋白 Recombinant Haptoglobin (Hpt)
RAB27B重組人 RAB27B 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Human 重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H6N8 重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
結(jié)合珠蛋白(Hpt)重組蛋白 Recombinant Haptoglobin (Hpt)
ANGPT2 Protein Human 重組人 ANG2 / Angiopoietin-2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
APOA1重組人 ApoAI 蛋白 Protein
HA Protein H6N8 重組甲型流感 H6N8 (A/mallard/Ohio/217/1998) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
RAB27B重組人 RAB27B 蛋白 Protein
小鼠腸黏膜上皮細(xì)胞大鼠亨廷頓蛋白(HTT)試劑盒 ，英文名： HTT ELISA Kit
Rat 26S proteasome (26S PSM) ELISA Kit 大鼠26S蛋白酶體(26S PSM)試劑盒
RatcytochromeP450,CYP450ELISAKit 大鼠細(xì)胞色素P450(CYP450)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforERELISAKit大鼠雌二醇受體
細(xì)胞0酸果糖激酶(PHOSPHOFRUCTOKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
Ratmacrophageinflammatoryprotein1α,MIP-1αELISAKit大鼠巨噬細(xì)胞癥蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒
收到細(xì)胞如何處理,？
1,、首先，觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,，培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象。若有,，請(qǐng)拍照,，并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）。
2,、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,，部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,；先不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,，了解細(xì)胞相關(guān)信息,，如貼壁特性（貼壁/懸浮）,、細(xì)胞形態(tài),、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例,、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢,、拍照,，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,，定期拍照,、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞：若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,，可正常傳代；若未超過(guò)80%,，移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,，預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng)，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,，瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞：將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),，1200rpm離心5min,，離心后上清培養(yǎng)基可收集備用，管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí)，若細(xì)胞密度超過(guò)80%,，可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),，補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml；若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,，將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),，直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
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