詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
皮膚組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7513 |
細胞簡介:
小鼠表皮角化分離自皮膚組織,;表皮位于動物皮膚的外層,,由胚胎時期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用,。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),,由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,,即基底層,、棘層、顆粒層,、透明層和角質(zhì)層,。表皮角化細胞(KC)是構(gòu)成表皮的主要細胞成分,在體內(nèi)處于不斷增殖過程中,,分裂的角化細胞主要位于其基底層,,少數(shù)位于棘細胞層。隨著向表層的推移,,細胞的分化程度逐漸增加,,并喪失分裂活性。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞,;
2,、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行,;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗,;
4,、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,,以利細胞生長;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行,。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠表皮角化先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的小鼠表皮角化經(jīng)PCNA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標(biāo)識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
豬血管緊張素Ⅱ試劑盒 豬血管緊張素Ⅱ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血管緊張素Ⅱ試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬血管緊張素Ⅱ試劑盒,、豬血管緊張素Ⅱeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬血管假血友病因子試劑盒 豬血管假血友病因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬血管假血友病因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬血管假血友病因子試劑盒,、豬血管假血友病因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月。
豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),產(chǎn)品別名:豬心肌肌鈣蛋白Ⅰ試劑盒,、豬心肌肌鈣蛋白Ⅰeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒 規(guī)格型號:96T/48T 豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒,規(guī)格型號:96T/48T,,來源:試劑盒(進口分裝),,產(chǎn)品別名:豬纖溶酶原激活物抑制因子試劑盒、豬纖溶酶原激活物抑制因子eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個月,。
豬細胞間粘附分子3(ICAM-3/CD50)ELISA 試劑盒
Human maix metalloproteinase 4 (MMP-4) ELISA Kit 人基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)試劑盒
Rabbitp53/tumorprotein,p53/TP53ELISAKit 兔p53(p53)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforANP(MouseAialNaiureticPeptide)ELISAKit小鼠心肽
血液半胱(cysteine)含量比色法定量試劑盒20次
Porcinegrowthhormone,GHELISAKit豬生長激素(GH)試劑盒
HERC2 E3泛素蛋白連接酶抗體
微絲相關(guān)蛋白3抗體
DPP7重組小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
補體成分3(C3)重組蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
CBLC重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
BCL2L2 Protein Human 重組人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
補體成分3(C3)重組蛋白 Recombinant Complement Component 3 (C3)
BCL2L2 Protein Human 重組人 BCL-W / BCL2L2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DPP7重組小鼠 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
BTC Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 BTC / Betacellulin 蛋白
CBLC重組人 Cbl-c / CBL-3 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠表皮角化細胞大鼠環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒 ,英文名: cAMP ELISA Kit
Rabbit maix metalloproteinase 2/ gelatinase A (MMP-2/G 兔基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A(MMP-2/G
腦膜奈瑟菌W135群(NM- W135)核酸試劑盒 48T
CLIAKitforMousekeratinocyteaocrinefactor/Amphiregulin,KAF/ARELISAKit小鼠角化細胞內(nèi)分泌因子/雙調(diào)蛋白
體液還原型(GSH)濃度比色法定量試劑盒50次
ELISAKitPⅠNP人Ⅰ型原膠原N端前肽