詳細介紹
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
子宮組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7227 |
細胞簡介:
人子宮內膜上皮分離自子宮組織;子宮是孕育胎兒的器官,,位于盆腔中部,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化,。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結構維持,,這些結構受損或松弛時,可以引起子宮脫垂,。子宮內膜即黏膜,,由上皮(屬單層柱狀上皮,有分泌細胞和纖毛細胞二種)和固有膜(由結締組織構成,,其內有大量的星形細胞,,稱為基質細胞)組成,子宮內膜可分為淺表的功能膜和深部的基底層,,功能層較厚,,約占內膜厚度的4/5;基底層較薄較致密,,約占1/5,,功能層可剝脫,而基底層剝脫,。子宮內膜上皮細胞主要功能:①子宮內膜亦稱子宮黏膜,,是指構成哺乳類子宮內壁的一層;②子宮內膜對動情素和孕激素都起反應,,因此可隨著性周期(發(fā)情周期,、月經周期)發(fā)生顯著的變化。子宮內膜與胚胎附植密切相關,,在生殖生理的研究中占重要地位,。在胚胎與母體“對話"的過程中,子宮內膜上皮細胞充當了極其重要的角色,。子宮內膜構成雌性哺乳動物子宮壁的最內層,,位于子宮腔面,,在動物生殖生理活動中占有重要地位。子宮和子宮內膜是維持雌性動物生理功能和生育能力的重要器官,,子宮內膜的再生修復是子宮的重要生理功能,。體外培養(yǎng)的子宮內膜上皮細胞對于研究其生理功能、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義,。
方法簡介:
公司實驗室分離的人子宮內膜上皮采用膠原酶消化法,,結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質量檢測:
公司實驗室分離的人子宮內膜上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達90%以上,且不含有HIV-1,、HBV、HCV,、支原體,、細菌、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存,。下面T25瓶為例,; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,,可使用血球計數(shù)板計數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,,注意凍存管做好標識,。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,,放入-80度冰箱,,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取,。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,,瓶壁可預先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長,。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,,如白血病細胞,、淋巴細胞、骨髓細胞,、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),,或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng),。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),,器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用,。
公司正在出售的產品:
小鼠巨噬細胞來源的趨化因子(mouse MDC) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠髓過氧化物酶(mouse MPO) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠粘蛋白(mouse MUC5AC) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠肌肉生成抑制素(mouse Myostatin) 作用: ELISA 規(guī)格: 進口分裝
小鼠瘤病毒16(HPV-16)試劑盒 96T/48T
Human endothelial lipase (EL) ELISA Kit 人內皮脂肪酶(EL)試劑盒
Humansreumalbumin,HSAELISAKit 人血清白蛋白(HSA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
guineapigfollicle-stimulatinghormone,FSH試劑盒豚鼠促卵泡素(FSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母同還原酶(aldo-ketoreductase)總活性比色法定量試劑盒20次
MouseCholecystokinin,CCKELISAKit小鼠膽囊收縮素/腸促肽(CCK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FITC標記小鼠CD45R單克隆抗體
核因子1A抗體
CDH1重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
CTn1 (cardiac troponin 1 0.5mgCTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
XRCC5 & XRCC6重組人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 蛋白 Protein
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白
PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白
CTn1 (cardiac troponin 1 0.5mgCTn1 (cardiac troponin 1) 心肌肌鈣蛋白
CXCL12 Protein Human 重組人 CXCL12 / SDF-1 蛋白
CDH1重組大鼠 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 Protein
PLAUR Protein Mouse 重組小鼠 PLAUR / CD87 / uPAR 蛋白
XRCC5 & XRCC6重組人 XRCC5 & XRCC6 Heterodimer 蛋白 Protein
人子宮內膜上皮細胞大鼠內向整流型離子通道亞家族J成員5(KCNJ5)試劑盒 ,英文名: KCNJ5 ELISA Kit
Mouse platelet derived growth factor AB (PDGF-AB) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生長因子AB(PDGF-AB)試劑盒
Ratai-alpha-FodrinIgG/IgA,α-FodrinIgG/IgAELISAKit 大鼠抗α-胞襯蛋白抗體IgG/IgA(α-FodrinIgG/IgA)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGL3(HumanGlucoseanspoer3)ELISAKit人葡萄糖轉運蛋白3
細胞分泌型堿性0酸酶化學發(fā)光法定量試劑盒20次
RatStemcellfactor/mastcellgrowthfactor,SCF/MGFELISAKit大鼠干細胞因子/肥大細胞生長因子(SCF/MGF)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一,、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性,;
2,、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L,;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4,、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6,、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,,漂?。?/p>
7,、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網狀,,應將原代細胞換液;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二,、懸浮細胞培養(yǎng)
1,、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3,、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,,進行分瓶試驗;
4,、長期培養(yǎng)時,,淋巴細胞中要加入生長因子,,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長,;
5,、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6,、細胞傳代一般待細胞增殖加快,、細胞密度較高時才能進行。