詳細(xì)介紹
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
子宮組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7230 |
細(xì)胞簡介:
人子宮頸上皮分離自子宮頸組織,;子宮頸位于子宮下部,近似圓錐體,,上端與子宮體相連,,下端深入陰道。陰道頂端的穹隆又將子宮頸分為兩部分:宮頸突入陰道的部分稱宮頸陰道部,,在陰道穹隆以上的部分稱宮頸陰道上部,。宮頸的中央為前后略扁的長梭性管腔,其上端通過宮頸內(nèi)口與子宮腔相連,,其下端通過宮頸外口開口于陰道,。內(nèi)外口之間即宮頸管。宮頸的大小與宮體比例隨年齡及內(nèi)分泌狀態(tài)等而變化,;宮頸壁由黏膜,、肌層和外膜組成,。子宮頸可有多種疾病,包括胚胎發(fā)育異常,、炎癥,、瘤樣病變、良性腫瘤,、惡性腫瘤,、損傷、宮頸性不孕,、輔助生育技術(shù),、宮頸與性、宮頸妊娠等許多問題,,體外培養(yǎng)的子宮頸上皮細(xì)胞對于研究其生理功能,、藥物作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮頸上皮采用膠原酶消化法,,結(jié)合上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮頸上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,,且不含有HIV-1、HBV,、HCV,、支原體、細(xì)菌,、酵母和真菌等,。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑,、Penicillin,、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%,;CO2,,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。1. 棄去培養(yǎng)上清,,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,,迅速拿回操作臺(tái),,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出,,在1000RPM條件下離心4分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中,。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例,; 1.細(xì)胞凍存時(shí),,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,,細(xì)胞變圓脫落后,,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù),。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清,。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%,。加入DMSO后迅速混勻,,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí),。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存,。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存,。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用,、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法,。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,,以利于組織塊粘著于瓶壁,,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞,、骨髓細(xì)胞,、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,,直接培養(yǎng),,或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系,、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒 96T/48T
小鼠基質(zhì)裂解素(ST2)試劑盒 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)試劑盒 96T/48T
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)試劑盒 96T/48T
小鼠酪蛋白酶試劑盒 96T/48T
Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特異性抗原(PSA)試劑盒
Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人結(jié)合蛋白4(RBP-4)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
humanadrencocoicoopichormone,ACTH試劑盒人促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-1(MET-1)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂聯(lián)素(ADP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
Fas相互作用蛋白激酶2抗體
核苷酸還原酶M2B抗體
CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein
Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)
GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein
DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白
MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白
Leptin receptor 瘦素受體(抗原 0.5mgLeptin receptor 瘦素受體(抗原)
DCLK1 Protein Human 重組人 DCAMKL1 / DCLK1 蛋白
CD160重組食蟹猴 CD160 蛋白 Protein
MANF Protein Mouse 重組小鼠 MANF / ARMET 蛋白
GPA33重組人 GPA33 / Glycoprotein-A33 蛋白 Protein
人子宮頸上皮細(xì)胞大鼠能受體β3(ADRβ3)試劑盒 ,,英文名: ADRβ3 ELISA Kit
Mouse peosidine ELISA Kit (Peosidine) 小鼠戊糖素(Peosidine)試劑盒
RatVitaminK1,VK1ELISAKit 大鼠K1(VK1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHBVpreS2Ag(HumanhepatitisBvirus)ELISAKit人乙型肝病毒前S2抗原
細(xì)胞α-L-巖藻糖苷酶(AFU)熒光定量試劑盒20次
swinemajorhistocompatibilitycomplexⅠ,MHCⅠ/SLAⅠELISAKit豬主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/SLAⅠ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1,、細(xì)胞要通過充分漂洗,,以盡量除去消化液的毒性;
2,、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,,至少為5×108細(xì)胞/L;
3,、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng),;
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5,、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng),;
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,,漂浮,;
7,、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液,;
8,、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液,。
二,、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2,、短期培養(yǎng),,可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3,、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),,進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4,、長期培養(yǎng)時(shí),,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,,以利細(xì)胞生長,;
5,、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次,;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快,、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行,。