詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品,、藥品,、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人子宮成纖維細(xì)胞
組織來源:子宮組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS,、生長添加劑,、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右,;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,,95%;CO2,,5%
細(xì)胞簡介:
人子宮成纖維分離自子宮組織,;子宮是孕育胎兒的器官,位于盆腔中部,,膀胱與直腸之間,,其位置可隨膀胱與直腸的充盈程度或體位而有變化。子宮的正常位置主要依靠子宮諸韌帶,、盆膈,、尿生殖膈及會陰中心腱等結(jié)構(gòu)維持,這些結(jié)構(gòu)受損或松弛時(shí),,可以引起子宮脫垂,。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來;成纖維細(xì)胞較大,,輪廓清楚,,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,,核仁大而明顯,。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化,;成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性,、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的子宮成纖維細(xì)胞呈圓形,、折光性良好,,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,,其中部分開始伸出偽足,,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁,,伸展成梭形,,胞核清晰,分布較均勻,,散在生長,,不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長迅速,,5-7天即呈融合狀態(tài),,細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,,平坦,、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,,細(xì)胞核較大,,呈橢圓形,,顏色淡,。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀,;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布,。子宮成纖維細(xì)胞的主要特征:①是子宮的重要細(xì)胞組成,,在體外易于培養(yǎng);②在子宮損傷后能修復(fù)和重塑子宮,;③在子宮炎癥時(shí)能有效控制炎癥擴(kuò)散,。
方法簡介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮成纖維采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶,。
質(zhì)量檢測:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人子宮成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1,、HBV,、HCV、支原體,、細(xì)菌,、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一,、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),,培養(yǎng)過夜,。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二,、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a),、對于貼壁細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣,、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次,。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化,。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,,棄去上清液,,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中,。
b)、對于懸浮細(xì)胞,,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中,。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠型纖溶酶原激活物受體 英文名稱: urokinase-plasmingen activator receptor 規(guī)格: 英文縮寫: uPA-R
小鼠超敏感度促甲狀腺素 英文名稱: Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone 規(guī)格: 英文縮寫: U.TSH
線粒體解偶聯(lián)蛋白2 英文名稱: Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2 規(guī)格: 英文縮寫: UCP2
小鼠血管細(xì)胞粘附分子-1 英文名稱: vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1 規(guī)格: 英文縮寫: VCAM-1
小鼠絨毛膜β(β-CG)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human brain g peptide (BGP/Gehrelin) ELISA Kit 人腦腸肽(BGP/Gehrelin)試劑盒
Humanvionectin,VELISAKit 人玻連蛋白/體外粘連蛋白(VN/CD51+CD61)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
guineapigImmunoglobulinA,IgA試劑盒豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞β-半乳糖苷酶活性比色法定量試劑盒20次
Mousecardioophln1,CT-1ELISAKit小鼠心肌營養(yǎng)素1(CT-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
FAM160B1蛋白抗體
過氧化氫異構(gòu)酶ALOXE3抗體
CD200重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
PSMA3重組人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein
CPB2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白
NP Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)
CPB2 Protein Human 重組人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白
CD200重組人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
NP Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)
PSMA3重組人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein
人子宮成纖維細(xì)胞大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶4(NOX4)試劑盒 ,,英文名: NOX4 ELISA Kit
Mouse thrombopoietin (TPO) ELISA Kit 小鼠血小板生成素(TPO)試劑盒
RatcoagulationfactorⅩ,FⅩELISAKit 大鼠Ⅹ(FⅩ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGM1(Humanai-gangliosideaibody)ELISAKit人抗抗體
細(xì)胞二脂酰甘油(DAG)含量酶連續(xù)循環(huán)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
RatSubstanceP,SPELISAKit大鼠P物質(zhì)(SP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
收到細(xì)胞如何處理?
1,、首先,,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液,、渾濁等現(xiàn)象,。若有,請拍照,,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)),。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài),。因運(yùn)輸問題,部分貼壁細(xì)胞會有少量從瓶壁脫落,;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài),。
3,、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基,、血清比例、所需細(xì)胞因子,、傳代比例,、換液頻率等。
4,、靜置完成后,,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢,、拍照,,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,,定期拍照,、記錄細(xì)胞生長狀態(tài)。
5,、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長密度超過80%,,可正常傳代;若未超過80%,,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,,瓶蓋可稍微擰松,。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),,1200rpm離心5min,,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打,、重懸,。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過80%,,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),,補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過80%,,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),,直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作